[發明專利]姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法

無效

• 申請號: 02136516.4
• 申請日: 2002-08-16
• 公開（公告）號: CN1398978A
• 公開（公告）日: 2003-02-26
• 發明（設計）人: 錢秀萍;藍德剛;王強
• 申請（專利權）人: 維京仲華（上海）生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C12N1/14
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司
• 代理人: 王巍

1、一種姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法，其特征在于該方法包括下列步驟：(1)姬松茸的育種與特征

用組織分離法獲得姬松茸純菌株AB103，將其接種在PDA或麥芽汁固定斜面培養基上，于25～28℃恒溫培養7～10天后，置于4℃左右的冰箱中保存備用，采用紫外誘變法對菌絲細胞進行誘變，紫外照射距離為20～30cm，照射時間為5～15秒，初篩誘變株在固體培養基上的菌絲體生長能力，復篩誘變株在液體培養基中菌絲體生長量和多糖肽產量，獲得優質菌株AB103-51；

固體培養用40～50％的稻草或木屑、棉子殼，1％的蔗糖或葡萄糖，10～20％麩皮或米糠，1％的石膏或碳酸鈣，加水拌勻，含水量60％，PH自然，瓶裝，在1.5kg/m²的壓力下滅菌1小時同，冷卻后，在無菌操作下搖瓶種子接種于固體培養基內，培養溫度22～26℃，20～30天菌絲體布滿全瓶，原基萌發后，降低栽培溫度22～25℃，保持適當溫度、光照和通風，30～40天后，子實體成熟；(2)菌株的發酵工藝流程

本發明采用通氣發酵法生產姬松茸菌絲體，發酵培養基成本低廉，發酵周期短，發酵工藝流程如下：

斜面菌種或茄瓶菌種→搖瓶種子→50-100L³種子罐，一級→500-1000L³種子罐，二級→5000-10噸發酵罐，

搖瓶種子的裝量75～150ml/250ml或150～150ml/250ml培養基，往復式搖床振蕩速度80～150次/分，或旋轉式搖床振蕩速度100～200轉/分，培養溫度100～200rpm，通氣量1∶0.5～1∶1v/v?min，發酵培養時間4～7天，隨著發酵培養時間延長，培養基由混濁逐漸變清，發酵液中還原糖、氨態氮、PH都逐漸降低，菌絲體生物量不斷增加，至第5～6天時多糖肽產量；(3)姬松茸多糖肽的提取

本發明所述姬松茸AB103-51的多糖肽提取工藝是：姬松茸發酵液用沙芯漏斗抽濾，分離發酵液和菌絲體，工廠可用板框機分離發酵液與菌絲體，將濕菌絲體加10～20倍水浸泡過夜，用90～100℃水浴回流提取2～5小時，過濾，將濾液濃縮后加2～5％倍的95％乙醇0～4℃沉淀8～10小時，干燥得姬松茸多糖肽。

2、根據權利要求1所述的一種姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法，其特征在于其中所述的優質菌株AB?103-51的分類命名為巴西蘑菇Agaricus?blazei，保藏編號為CGMCC?No.07722001325B。

3、根據權利要求1所述的一種姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法，其特征在于其中所述的優質菌株AB103-51的發酵工藝，其種子培養基的特征是100ml的培養基玉米粉1～3g、淀粉1～2g、硫酸鎂0.05～0.1g、磷酸二氫鉀0.1～0.2g。

4、根據權利要求1所述的一種姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法，其特征在于其中所述的優質菌株AB103-51的發酵工藝，其發酵培養基的特征是100ml的培養基的配比是淀粉1～3g、麩皮0.1～0.6g、葡萄糖或蔗糖0.5～1g、酵母粉0.1～0.5g、硫酸鎂0.05～0.2g、磷酸二氫鉀0.1～0.3g。

5、根據權利要求1所述的一種姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法，其特征在于其中所述的發酵工藝的特征是發酵罐培養可添加泡敵或豆油適量。

6、根據權利要求1所述的一種姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法，其特征在于其中所述的發酵工藝的特征是培養基中可添加玉米漿，添加量為0.1～1％。

7、根據權利要求1所述的一種姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法，其特征在于其中所述的發酵工藝的特征是搖瓶種的發酵條件250ml搖瓶裝量75～150ml培養基，500ml搖瓶裝量150～250ml培養基，采用往復式搖床，振蕩速度80～150次/分，或旋轉式搖床，振蕩速度度100～200轉/分，培養溫度24～28℃，培養時間2～3天。

8、根據權利要求1所述的一種姬松茸的發酵工藝及其多糖肽的生產方法，其特征在于其中所述的發酵工藝的特征是發酵條件：接種量8～10％，攪拌速度100～200rpm，通氣量1∶0.5～1∶1v/v?min，發酵溫度為24～28℃，罐壓0.3～0.5kg/cm²，發酵培養時間2～3天。