[發明專利]巴西蟲草菌絲體深層發酵培養方法

無效

• 申請號: 02134573.2
• 申請日: 2002-08-19
• 公開（公告）號: CN1397635A
• 公開（公告）日: 2003-02-19
• 發明（設計）人: 梁淑娃;彭中健;杜少平;楊冠東
• 申請（專利權）人: 廣州市微生物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 何燕玲

技術領域

本發明屬于生物發酵領域，更具體地說是關于一種巴西蟲草菌絲體深層發酵培養方法。

背景技術

冬蟲夏草(Cordyceps?Sinesis(Berk)Sacc)是一種名貴滋補強壯藥，它具有廣泛的藥用價值，如增強細胞免疫和體液免役功能，雄性激素樣的作用等。但天然蟲草來源有限，價格昂貴。

發明內容

本發明提供了一種用巴西蟲草菌種經深層發酵生產蟲草菌絲粉的方法。

本發明的目的是通過如下的技術方案解決的：

利用巴西蟲草菌種，采用新研制的培養基配方，在發酵罐中通氣培養，控制適宜的溫度、攪拌速度、酸堿度等培養條件，發酵生產蟲草菌絲體，菌絲體經干燥后制得純蟲草菌絲粉。方法主要包括搖瓶培養、種子罐培養、發酵罐培養，具體工藝如下：

(1)搖瓶培養：接入巴西蟲草菌種，在22-32℃，搖床轉速120-300轉/分的條件下，培養3-6天后，接入種子罐培養；

(2)種子罐培養：將搖好的搖瓶種子接入種子罐中，接種量1-15％，在22-32℃，攪拌速度150-500轉/分，罐壓0.03-0.12兆帕，風量1∶0.3-1∶1.2體積/體積/分的條件下，培養1-4天；

(3)發酵罐培養：將已培養好的種子接入發酵罐，接種量為5-20％，在22-32℃，攪拌速度150-350轉/分，罐壓0.02-0.12兆帕，風量1∶0.3-1∶1.2體積/體積/分，pH6.5-8.0的條件下，培養3-6天，得蟲草菌絲體，干燥得蟲草菌絲粉；

其中所用的的培養基組分及重量百分含量為：淀粉0.5-4％、糖0.75-2％、蛹酪素0.5-4％、無機鹽0.01-0.2％，pH?6.5-8.0，固體培養基加1-2％瓊脂。

本發明所述的方法中培養基的組分及重量百分含量的優選方案為：淀粉0.8-3.5％、葡萄糖0.8-1.8％、蛹酪素0.8-3％、MgSO₄及K₂HPO₄?0.03-0.1％，pH?6.5-8.0，固體培養基加1-2％瓊脂。

本發明中所用的巴西蟲草菌種是從天然冬蟲夏草經常規的組織分離、馴化培養而得到。

利用該工藝方法得到的蟲草菌絲粉主要成份和藥理作用與天然冬蟲夏草基本一致：微量元素Cu、Zn、Sr等的含量大體一致；富含的19種人體必需氨基酸中，除門冬氨酸、組氨酸、精氨酸外，其余基本一致；主要有效成份D-甘露醇、麥角甾醇、蟲草多糖的含量蟲草菌絲粉略高于天然冬蟲夏草；兩者在增強細胞免疫、體液免疫及雄性激素樣方面的藥理作用相近；該工藝生產的蟲草菌絲粉對CCl₄誘發的肝損傷有一定的保護作用。

該工藝可進行大規模生產，生產成本低，具有較高的開發價值。該工藝生產的蟲草菌絲粉與天然蟲草的主要成分與藥理作用基本一致，為其代替天然蟲草奠定了基礎。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明的方法作進一步的說明。

實施例1

(1)搖瓶培養

50升的種子罐，以裝量30升計，接種量3％，則配搖瓶培養基的量為30升×3％＝0.9升。按淀粉1％、葡萄糖1％、蛹酪素1％、MgSO₄?0.05％、K₂HPO₄?0.05％、pH6.8的配方，配0.9升培養液，分裝在500毫升三角瓶中，每瓶裝量為100毫升，裝好后滅菌，冷卻至30℃，接入試管種。每瓶接入種塊2塊約0.5平方厘米。搖床轉速為180轉/分，控制溫度為25℃，經4天培養后，接種至50升種子罐培養。

(2)種子罐培養??

50升的種子罐實裝量為30升，減去搖瓶種量0.9升，則為30-0.9＝29.1升。按本實施例(1)所述配方，配29.1升培養基(實際只加水至26升，預計滅菌時有3升的蒸汽冷凝水)，培養基滅菌后，待溫度降至30℃時接入搖好的搖瓶種子，接種量為10％，控制種子罐的溫度為25℃，攪拌轉速為300轉/分，通風量為1∶0.5體積/體積/分，罐壓為0.05兆帕，培養2天后，種子罐種子接種至500升發酵罐中發酵培養。

(3)發酵罐培養