[發明專利]厭氧菌感染的一種快速診斷的方法

無效

• 申請號: 02115903.3
• 申請日: 2002-05-30
• 公開（公告）號: CN1386863A
• 公開（公告）日: 2002-12-25
• 發明（設計）人: 薛存寬;王模榮;蔣鵬;王玲;袁彬
• 申請（專利權）人: 華中科技大學同濟醫學院附屬梨園醫院
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12Q1/37
• 代理公司: 武漢開元專利代理有限責任公司
• 代理人: 朱盛華

1、厭氧菌感染的一種快速診斷的方法，其特征在于其具體步驟為：

1)標本采集：用臨床普通常規方法采集標本

2)標本的預處理：

(1)液體標本直接加飽和氯化鈉成飽和溶液后鹽析，

(2)粘稠標本，如痰、膿類，加酸如2～10％鹽酸+次氯酸(1∶2～6)或酶震蕩消化數分鐘，充分溶解后，再加飽和氯化鈉鹽析，酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、菠蘿蛋白酶，

(3)固體標本，如組織塊，先剪碎研磨成勻漿，再加酸或酶震蕩消化成溶液，后加飽和氯化鈉鹽析，酸與酶如上，

3)標本的固相微萃取(SPME)：萃取針頭采用有聚乙烯乙二醇/二乙烯苯、聚乙烯乙二醇/陰離子樹脂或聚二甲基硅氧烷/二乙烯苯復合涂層的針頭，萃取方式采用密封瓶離取樣液面1公分左右頂空萃取法，萃取1分鐘以上，或液中萃取5分鐘以上，

4)氣相色譜分析：色譜柱——彈性石英毛細管色譜柱或填充柱，固定相為聚乙二醇20M和2-硝基對苯二甲酸的反應物，簡稱FFAP，

載氣——N₂，

檢測器——氫火焰檢測器或熱導池類檢測器，

汽化室溫度——200～250℃，

脫附時間——5～10以上秒，

柱溫——90～150℃下恒溫，為理想分離各成分峰，或在60～220℃分二階或多階程序升溫，

靈敏度——10^2～3，衰減1/1～8，

5)診斷：采用定性診斷，以明確、清晰檢出以下成分峰為陽性，即為厭氧菌感染

(1)明確、清晰檢出有異丁酸、戊酸、異戊酸峰中之一者，

(2)明確、清晰檢出有乙酸、丙酸及另外一種短鏈脂肪酸峰中之一者，

(3)明確、清晰檢出有二種非異丁酸、戊酸、異戊酸、乙酸、丙酸的短鏈脂肪峰者。

2、根據權利要求1所述的快速診斷的方法，其特征在于頂空萃取宜在超聲震蕩、加溫或攪拌下進行。