[發明專利]一種食品功能因子γ－氨基丁酸的制備方法

無效

• 申請號: 02113140.6
• 申請日: 2002-06-08
• 公開（公告）號: CN1392262A
• 公開（公告）日: 2003-01-22
• 發明（設計）人: 江波;許時嬰;許建軍
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12P13/04
• 分類號: C12P13/04;//;C12R1225)
• 代理公司: 無錫市大為專利事務所
• 代理人: 時旭丹

1.一種γ-氨基丁酸的制備方法，其特征是用乳酸菌(lactobacillusplantarum，streptococcus?lactis，Lactococcus?lactis，Lactobacilluscasei)或乳酸菌和酵母菌(Saccharomyces?sp)混用作為菌種，以L-谷氨酸鈉(L-MSG)為轉化底物，采用適當碳源和氮源以及無機鹽組成發酵培養基，發酵法生物轉化制備γ-氨基丁酸，

A.菌種

采用單一乳酸菌或乳酸菌和酵母菌混用作為菌種，

B.培養基

瓊脂斜面保藏培養基(％)：酵母膏1.0％，葡萄糖1.5％，碳酸鈣1.5％，瓊脂1.5％，

24#乳酸菌培養基(％)：牛肉膏0.5％，酵母膏0.5％，葡萄糖1.0％，乳糖0.5％，蛋白胨1.0％，NaCl?0.5％，瓊脂2.0％，pH6.8，

PY基礎培養基(％)：內含蛋白胨0.5％，胰胨(Tryptone)0.5％，酵母提取物1.0％，鹽溶液4.0ml/100ml，(鹽溶液g/1000ml含CaCl₂，0.2；MgSO₄·7H₂O，0.48；K₂HPO₄，1.0；KH₂PO₄，1.0；NaHCO₃，10.0；NaCl，2.0)，pH6.8，

發酵種子培養基：MRS液體培養基，

GYP發酵培養基(％)：葡萄糖1.0％，酵母膏1.0％，蛋白胨0.5％，乙酸鈉0.2％，L-MSG1.0％，MgSO₄·7H₂O20ppm，MnSO₄·4H₂O1ppm，NaCl1ppm，FeSO₁·7H₂O1ppm，pH6.8，

C.制備工藝

菌種保存：所選菌種根據要求分別在瓊脂斜面保藏培養基、24#乳酸菌培養基上傳代，冰箱4℃保存，2～4周轉接一次，使用前活化2次，

種子培養：在GYP發酵培養基或者MRS液體培養基中進行，發酵前經2次傳代，培養16小時，

發酵：培養16小時的種子培養液離心收集菌體，用無菌水制成菌體懸浮液(～10⁹CFU/ml)，以0.2％～2.0％的接種量，接入添加不同碳源和氮源的PY基礎培養基中，250ml三角瓶中的裝液量為50ml，碳源分別為葡萄糖，麥芽糖，可溶性淀粉，以及它們與L-谷氨酸鈉(L-MSG)的混合物，添加水平0.5％～3％，氮源分別為蛋白胨、胰胨、酪蛋白、酪蛋白磷酸肽(CPP)、脫脂豆粕粉，玉米漿、酵母膏、脫脂花生餅粉、脫脂棉籽餅粉、米糠、酪蛋白等，添加水平0.5％～5％，25℃～40℃靜置培養1～6天，得到γ-氨基丁酸發酵液，

所得到的終了發酵液中，γ-氨基丁酸含量可達到300～500mg/100ml，此溶液脫臭后，可直接干燥制成粉劑，粉劑中γ-氨基丁酸含量在5％以上，也可進一步精制純化，用作功能性食品添加劑，

D.結晶純化

將γ-氨基丁酸溶液用強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂進行離子交換，氨水洗滌、提取，再經樹脂純化、濃縮、結晶、干燥后即得成品γ-氨基丁酸。