[發明專利]羥基磷灰石與脂質體的核－殼式納米復合粒子的制備方法

無效

• 申請號: 02111131.6
• 申請日: 2002-03-22
• 公開（公告）號: CN1374132A
• 公開（公告）日: 2002-10-16
• 發明（設計）人: 儲茂泉;徐宇虹;劉書朋
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: A61K47/02
• 分類號: A61K47/02;A61K47/46;B82B1/00;A61L27/12;A61P35/00
• 代理公司: 上海交達專利事務所
• 代理人: 王錫麟

技術領域：本發明涉及的是一種納米復合粒子的制備方法，特別是一種羥基磷灰石與脂質體的核-殼式納米復合粒子的制備方法，屬于生物醫學工程領域。

背景技術：羥基磷灰石是人和動物骨骼和牙齒中的重要無機成分，是近年來生物材料領域中研究的熱點。人工合成的羥基磷灰石是一種理想的骨替換材料，并可以作為生物色譜柱以及作為藥物尤其是抗癌藥物的載體。當前，更有人提出，羥基磷灰在納米尺度時對多種癌細胞具有毒殺作用，而且這種奇特功效需要羥基磷灰石具備一定的尺度效應。然而，納米粒子很不穩定，很容易聚集沉降，而且羥基磷灰石為難溶于水和有機溶劑的無機化合物，若將真正發展納米羥基磷灰石在醫藥上的應用，需將納米技術與生物學知識進行融合，目前常用的制備方法并不完全適合生物醫藥上應用的要求。經文獻檢索，尚未發現有與本發明主題相同報道，尤其是對于它的抗癌作用、機理以及給藥方法方面的研究還很不充分。

發明內容：本發明針對現有技術的不足，提供一種羥基磷灰石與脂質體的核-殼式納米復合粒子的制備方法，制備一種形貌可控和粒度單分散的穩定的羥基磷灰石與脂質體的核-殼式納米復合粒子，使納米復合粒子能更好地應用于腫瘤治療和骨缺損的修復之中。本發明以脂質體內水相為微反應器，以無機化合物為反應原料，根據生物礦化原理仿生合成具有核-殼式顯微結構特點的羥基磷灰石與脂質體的核-殼式納米復合粒子，并在核-殼式納米復合粒子表面接上具有特異生物功能的化合物以對復合粒子進行表面修飾。

以脂質體內水相為納米反應器，合成具有核-殼式顯微結構特點的納米復合粒子，以脂質材料為脂質體膜材自組裝成脂質體，以無機化合物為原料合成無機納米粒子即羥基磷灰石，以脂質體為殼體，以合成的羥基磷灰石納米粒子為核，形成具有核-殼式顯微結構特點的納米復合粒子。

本發明制備方法為：先制備包埋待反應的一種或多種離子的脂質體混懸液，除去脂質體外未被包埋的待反應的離子，然后加入待反應的另一種或幾種離子溶液，調整反應條件，拌以攪拌，即獲得羥基磷灰石與脂質體的核-殼式納米復合粒子。

將包埋待反應的離子的脂質體混懸液進行冷凍融溶，冷凍的溫度范圍為0℃～-180℃，融溶的溫度范圍為0℃～100℃，冷凍融溶次數為0～20次，然后除去脂質體外未被包埋的待反應的離子，再加入待反應的另一種或幾種離子溶液，拌以攪拌，即獲得羥基磷灰石與脂質體的核-殼式納米復合粒子。

制備羥基磷灰石與脂質體的核-殼式納米復合粒子的pH范圍為0～14，溫度范圍為0℃-100℃，羥基磷灰石中的Ca與P的摩爾比范圍為0.5～3，羥基磷灰石與脂質體的核-殼式納米復合粒子中，鈣元素與脂類材料的摩爾比范圍為0.001～50000，該納米復合粒子是以混懸液狀態存在，混懸液的連續相為去離子水或蒸餾水或0.9％的生理鹽水或緩沖液。

合成羥基磷灰石納米粒子的無機化合物原料是指：CaHPO₄、CaCl₂、Ca(NO₃)₂、Ca₃(PO₄)₂、CaO、Ca₄P₂O₉、NaOH、KOH、NH₃·H₂O、NH₄OH，所說的脂質體為粒度為5納米到100微米之間的納米脂質體、亞微米脂質體和微米脂質體。

復合粒子的脂質膜(殼)的構成為磷脂分子、lysolipid分、糖脂(glycolipid)分子、甾醇(sterol)分子、陽離子脂質分子、去垢劑(detergent)分子以及雙親性聚合物等，及其任意組合。

本發明所說的納米復合粒子是一組裝物，其結構為：納米復合粒子的核是合成的羥基磷灰石納米粒子，殼體是脂質體，并可以以脂質體膜為基底進行功能性修飾。

在核-殼式復合粒子中還可以裝載藥物及其他活性物質，藥物可在羥基磷灰石合成之前、之中或之后加入。

對核-殼式納米復合粒子進行表面修飾是指在脂質體制備過程中加入修飾材料，或合成反應結束后加入修飾材料，在核-殼式納米復合粒子表面進行功能性修飾，修飾方法包括物理吸附和化學反應。

復合粒子表面修飾的功能分子為親水性聚合物，疏水性聚合物，配體，抗體，細胞因子，多肽，核酸等，及其任意組合，分子量為50-50000?Dalton.它們與表面分子的作用為物理作用，生物作用，或化學鍵連，表面的修飾度為0-99％摩爾比。