[發(fā)明專利]類球紅細菌工業(yè)化規(guī)模發(fā)酵方法及其發(fā)酵液

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 01129652.6
• 申請日: 2001-06-26
• 公開（公告）號: CN1393546A
• 公開（公告）日: 2003-01-29
• 發(fā)明（設計）人: 王棟
• 申請（專利權）人: 山東萬和生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/00;A61K35/64;A61K35/78;A61P3/10;A23L2/38;A23L1/30;C05B11/08
• 代理公司: 北京雙收專利事務所
• 代理人: 左明坤

本發(fā)明涉及一種利用細菌發(fā)酵制成一種功能性發(fā)酵液的生產方法，特別是利用類球紅細菌(Rhodobacter?sphaeroides)制成一種功能性發(fā)酵液的生產方法。

目前，對于類球紅細菌(Rhodobacter?sphaeroides)的研究僅限于實驗室水平，沒有利用類球紅細菌(Rhodobacter?sphaeroides)的技術方案進行工業(yè)規(guī)模的深層發(fā)酵方法。同時，在飲料行業(yè)中，缺少一種利用生物發(fā)酵技術生產的能對人體的健康起到極大促進作用的飲料。

本發(fā)明的目的是提供一種利用對類球紅細菌(Rhodobacter?sphaeroides)進行深層的工業(yè)化規(guī)模的發(fā)酵方法，得到的發(fā)酵液對人體的健康有益，能對人體的免疫系統進行調節(jié)，增加人體抵抗力。

培養(yǎng)液的配方如下：

a、無機鹽溶液配比；(1000ml蒸餾水中)

MgSO4·7H2O?????????2.0克

CaCl·2H2O??????????0.75克

FeSO4·7H2O?????????0.12克

NaEDTA???????????????0.2克

b、微量元素溶液配比；(250ml蒸餾水中)

H3BO4???????????????0.7克

MnSO4???????????????398毫克

NaMoO4??????????????180毫克

ZnSO4???????????????60毫克

Cu(NO3)2????????????10毫克

c、生長因子溶液配比；(100ml蒸餾水中)

生物素??????????????1.5毫克

維生素B1????????????100毫克

煙酸????????????????100毫克

對氨基苯甲酸????????100毫克

??d、乳酸溶液配比；(1000ml溶液)

蒸餾水??????????????800毫升

乳酸????????????????200毫升(用12N的NaOH溶液調pH6.5)

??e、硫酸銨溶液配比；(1000ml溶液)

蒸餾水????????????800毫升

硫酸銨????????????20克

溶解后用蒸餾水添至1000毫升，然后用12N的NaOH溶液調pH6.5

f、磷酸緩沖液；(1000ml蒸餾水中)

K2HPO4????????????60克

KH2PO4????????????40克

分別取：

????a、無機鹽溶液?????????????10％、

????b、微量元素溶液???????????0.1％

????c、生長因子溶液???????????0.1％

????d、乳酸溶液???????????????2％

????e、硫酸銨溶液?????????????0.5％

????f、磷酸緩沖液?????????????1.5％

將配比a-f按照上述百分比進行混合，其余為水，即得到培養(yǎng)液。

做斜面試管或培養(yǎng)皿培養(yǎng)基時候另外添加：蛋白胨1％，酵母膏0.5％。

菌種來源：

山東省蓬萊市村里集鎮(zhèn)宋家河上段淤泥中。

菌種保藏號：

中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC?No.1.2778。

保藏時間：2001年6月14日。

分離方法：

于7-8月取河中淤泥1升，用按照上述方法配制的培養(yǎng)液10升分別裝入22個500ml三角燒瓶中，用紗布包棉塞塞好瓶中，外用舊報紙包好，用紙繩扎緊，置于高溫滅菌鍋內加熱至121℃進行30分鐘滅菌后，降至28℃。將淤泥在無菌室內邊攪拌慢慢地分別平均地分入22瓶培養(yǎng)液。然后用10％乳酸溶液調節(jié)pH6.5-6.8，用原瓶上的棉塞塞好，包好報紙用紙繩扎緊，置于28-30℃恒溫搖床上，搖床轉速每分鐘50-60轉搖動，同時給白熾燈光照，光照要求每平方米100LX即可。搖床培養(yǎng)40小時后，取有紅色反應的培養(yǎng)液(取上層液)，在接種室內用移液管移入培養(yǎng)皿(按照上述的培養(yǎng)基配方配制)，置于上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng)一周，然后再從培養(yǎng)皿中在無菌室內取紅點較大的菌落接入上述相同的培養(yǎng)液中，進入扶壯培養(yǎng)，這樣反復進行數十次分離培養(yǎng)、扶壯，取樣鏡檢，達到無雜菌的純種并能在24小時的發(fā)酵指數達到35億個/毫升以上可為生產用種。

生產方法：