[發(fā)明專利]用于產(chǎn)前診斷的蛋白質(zhì)芯片及制造方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 01126115.3
• 申請(qǐng)日: 2001-07-12
• 公開（公告）號(hào): CN1330271A
• 公開（公告）日: 2002-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張濤;李賓;彭永濟(jì);任一萍;葛海鵬;鄧富橋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海晶泰生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 上海東亞專利事務(wù)所
• 代理人: 董梅

1.一種用于產(chǎn)前診斷的蛋白質(zhì)芯片，其特征在于將弓形蟲、風(fēng)疹、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒五項(xiàng)指標(biāo)的抗原以及陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照點(diǎn)陣于多樣品微陣列生物芯片的同一個(gè)腔室內(nèi)，蛋白質(zhì)通過化學(xué)鍵連接于固相載體上而被固定，多樣品微陣列生物芯片的每一個(gè)腔室均點(diǎn)陣了上述五項(xiàng)指標(biāo)的抗原。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于產(chǎn)前診斷的蛋白質(zhì)芯片，其特征在于所述在固相載體上點(diǎn)陣的抗原為純化的上述寄生蟲或病毒的特征性抗原。

3.根據(jù)權(quán)利要求1、2所述的用于產(chǎn)前診斷的蛋白質(zhì)芯片，其特征在于陰性對(duì)照采用牛血清白蛋白(Bovine?Serum?Albumin，BSA)，陽(yáng)性對(duì)照采用人類免疫球蛋白G或M(IgG/IgM)。

4.用于產(chǎn)前診斷的蛋白質(zhì)芯片的用途，其特征在于將病人血清滴加于芯片表面，病人血清中的抗體分別與固定在芯片上的相對(duì)應(yīng)的抗原結(jié)合，洗去未結(jié)合的其他物質(zhì)后，加入熒光標(biāo)記的二抗，在測(cè)血清IgG的腔室里，二抗采用抗IgG二抗，在測(cè)血清IgM的腔室里，采用抗IgM二抗；洗去未結(jié)合的二抗，樣品點(diǎn)的熒光強(qiáng)度與血清中抗體濃度大小成正比。

5.用于產(chǎn)前診斷的蛋白質(zhì)芯片的制造方法，其特征在于：(1)根據(jù)樣品數(shù)目選擇合適的多樣品微陣列生物芯片，確定每個(gè)樣品對(duì)應(yīng)的檢測(cè)IgG和IgM的腔室，作好記號(hào)，并確定點(diǎn)陣的排列方式和點(diǎn)樣位置；(2)點(diǎn)樣針從多孔板取出蛋白質(zhì)樣品(各項(xiàng)指標(biāo)的抗原)后直接高密度點(diǎn)印于醛基化的玻璃片上；(3)室溫過夜或37℃溫育1小時(shí)，使蛋白質(zhì)的氨基和玻璃片上的醛基發(fā)生縮合反應(yīng)，以固定樣品；(4)利用制作蛋白質(zhì)芯片的常規(guī)方法封閉、洗滌、干燥、包裝、保存。

6.用于產(chǎn)前診斷的蛋白質(zhì)芯片的使用方法，其特征在于：(1)在點(diǎn)好樣的芯片上滴加病人血清樣品，37℃溫育1小時(shí)，使抗原抗體充分反應(yīng)；(2)用低濃度鈉離子鹽為主的洗脫液洗去多余樣品，室溫晾干；(3)加封阻液封阻并再次洗凈晾干；(4)滴加以封阻液稀釋過的熒光標(biāo)記二抗，在測(cè)血清IgG的腔室里，二抗采用抗IgG二抗，在測(cè)血清IgM的腔室里，采用抗IgM二抗；(5)37℃避光溫育30分鐘，洗凈并室溫晾干；(6)反應(yīng)結(jié)束后，對(duì)芯片進(jìn)行讀取和分析。