[發明專利]大蹼鈴蟾鈴蟾肽及其制備方法和其基因

無效

• 申請號: 01108521.5
• 申請日: 2001-06-08
• 公開（公告）號: CN1390851A
• 公開（公告）日: 2003-01-15
• 發明（設計）人: 張云;賴仞;劉衡;李文輝
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明動物研究所
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K1/14;C12N15/11;C07H21/00
• 代理公司: 昆明大百科專利事務所
• 代理人: 楊宏珍

1，大蹼鈴蟾鈴蟾肽，其特征是從中國兩棲類動物大蹼鈴蟾皮膚分泌物中分離得到的由16個氨基酸組成的一種單鏈多肽，分子量1887，等電點10.6，多肽氨基酸全序列一級結構為：焦谷氨酸-賴氨酸-賴氨酸-脯氨酸-脯氨酸-精氨酸-脯氨酸-脯氨酸-谷氨酰胺-色氨酸-丙氨酸-纈氨酸-甘氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-酰胺化甲硫氨酸。

2，大蹼鈴蟾鈴蟾肽的制備方法，其特征是將活體大蹼鈴蟾用水清洗干凈，置于帶蓋的玻璃容器中，滴加無水乙醚，密閉容器3-5分鐘，可見大量的泡沫狀物質從大蹼鈴蟾皮膚分泌出來，收集分泌物，離心去除沉淀、冷凍干燥后，經凝膠過濾、高壓液相反相柱層析分離純化后即得到。

3，大蹼鈴蟾鈴蟾肽基因核苷酸序列，其特征在于cDNA由522個核苷酸組成，其自5’端至3’端序列為：

CTCAGACTCTCACAGCTCTGCGGTACTCACAGCTTTAGACATGTCTGCAATTCCTCTGAA

CAGGATCCTGCCTCTAGGGTTCCTATTTTGCCTGCTTCTTTCCTCCTTCATTTCTCTGTC

CAGCTGCATGGAGTTCGTTGAAGATGCCAACAATCAGGGCAGAATCAGCCTGCAGAAGAA

GCCACCCCGGCCACCCCAGTGGGCAGTGGGTCACTTCATGGGTAAGAAGAGCCTGCAAGA

CATGGACTTTGAAGAGATGGGAAGTTTTGCTAAACGTAGCGTTGAGAAGATTAGAGCTGC

TCTCCTGCAAGAGCAGCAAGGAGCAGGATCAGAAAGAGAGCTGCGGCATGCACAGTTGGT

AGCAAGGGAGATCTTGGCGCAGTATCTGGAGAATATGCAGAATTAGCAAAGAAATGTTTC

CTCCTGTACATACAGAAATATAAATAAATATATTTGTGCCTGAGATATGGGACTTATTTT

ACACATTCCAAAAGTTTATTGTTTACAAAAAAAAAAAAAAAA

4，根據權利要求3所述的大蹼鈴蟾鈴蟾肽基因核苷酸序列，其特征在于，編碼成熟大蹼鈴蟾鈴蟾肽為第173-220位核苷酸，其氨基酸序列為：

??????????pEKKPPRPPQWAVGHFM-NH₂