[發明專利]一種使用免疫PCR技術的紅斑狼瘡抗Sm抗體的檢測方法無效
| 申請號: | 01106288.6 | 申請日: | 2001-03-07 |
| 公開(公告)號: | CN1373364A | 公開(公告)日: | 2002-10-09 |
| 發明(設計)人: | 晏舒;曾常茜;尹學念;遲婉莉;李乃奚;欒瑩莉 | 申請(專利權)人: | 吉化集團公司總醫院 |
| 主分類號: | G01N33/53 | 分類號: | G01N33/53;G01N33/558 |
| 代理公司: | 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 | 代理人: | 丁洪學 |
| 地址: | 132022 吉*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 使用 免疫 pcr 技術 紅斑狼瘡 sm 抗體 檢測 方法 | ||
一種使用免疫PCR技術的紅斑狼瘡抗Sm抗體的檢測方法,其特征是:利用酶標軟板,在每個孔中加入1∶1000~1∶2000(1000U/ml)稀釋的SmAg100μl在37℃溫度下1~2h;然后用洗滌液洗滌3次,每孔加50μl~200μl封閉液,在25~30℃溫度下封閉30min~1h;取出后再用洗滌液洗滌3次,每孔加入100μl血清,37℃溫育40min;取出后再洗滌3次,之后加入1∶1500~1∶2500稀釋的SaHIgG-DNA探針100~200μl,37℃溫育45min;取出,再洗滌3~5次,最后加入PCR反應混合物,覆蓋70μl石蠟油,在PCR擴增儀上進行擴增,擴增條件為,預變性94℃2min再行94℃40sec,55℃40sec,72℃60sec共35個循環,繼續72℃延伸5min;擴增后,取PCR擴增產物20μl加入到2%瓊脂糖凝膠中電泳,經EB染色,在紫外反射透射儀上觀察結果,照相;同時設PCR陽性對照,同上法進行PCR擴增。
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