[發明專利]從轉基因抗菌肽蠅蛆中制備人用基因抗菌肽藥品的方法無效
| 申請號: | 01106190.1 | 申請日: | 2001-02-23 |
| 公開(公告)號: | CN1312292A | 公開(公告)日: | 2001-09-12 |
| 發明(設計)人: | 茍仕金;茍鴻鷹;王成余 | 申請(專利權)人: | 遼寧天成生物制藥研究所 |
| 主分類號: | C07K14/435 | 分類號: | C07K14/435;A61K35/64;A61K38/02 |
| 代理公司: | 遼寧專利事務所 | 代理人: | 李叢 |
| 地址: | 110031 遼*** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 轉基因 抗菌 肽蠅蛆中 制備 基因 藥品 方法 | ||
1、從轉基因抗菌肽蠅蛆中制備人用基因抗菌肽藥品的方法,收集蠅蛆→蠅蛆滅菌技術處理→蠅蛆抗菌肽含量→低溫深凍、貯存原料低溫粉碎制成超微勻漿→抽提去除雜質→濃縮→分離純化→鑒定各項指標→加穩定劑及賦形劑→調配不同規格制品→半成品鑒定→成品分裝。
2、根據權利要求1所述的制備人用基因抗菌肽藥品的方法,冷凍的轉基因抗菌肽蠅蛆用絞肉機絞碎,再用膠體磨研磨制成勻漿,倒入大罐內,按勻漿量1∶1加入蒸餾水置入加層升溫鍋,使溫度加熱至100度,持續20分鐘,用輸液泵把藥液輸入濾槽內進行過濾,再將藥液放入水槽冷卻,微孔濾膜過濾除去殘渣,藥液為抗菌肽粗品,置于2-8度保存。
3、根據權利要求1或2所述的制備人用基因抗菌肽藥品的方法,從冷凍庫中提取轉基因抗菌肽蠅蛆的合格原料10公斤,將凍塊分割絞碎,制成勻漿,加10公斤蒸餾水攪拌,升溫100度持續20分鐘,降溫除去變性蛋白及殘渣,兩次超濾濃縮,過層析柱,收集藥液,置于2-8度低溫保存,供制劑抗菌肽藥品用。
4、根據權利要求1所述的制備人用基因抗菌肽藥品的方法,取微孔濾膜除去殘渣的抗菌肽藥液再用5000分子量超濾膜超濾除5000以上大分子,然后用3000分子量超濾膜除3000以下小分子,濃縮最后過層析柱,分離得到的半成品原液其抗菌肽純度達98%,也可將加熱升溫后的勻漿,用大容量低溫離心收集上清液,將上清液加入硫酸銨沉淀,離心分離收集沉淀,然后在沉淀中加入緩沖液溶解,離心分離收集上清液,上清液經G-25脫鹽、DEAE離子交換柱、phenyl疏水層析過柱、S-100凝膠層析柱分離得到合格的半成品原液,純度也可達98%。
5、根據權利要求1或4所述制備人用基因抗菌肽藥品的方法,從轉基因抗菌肽家蠅工廠化無菌飼養場冷凍庫取回轉基因抗菌肽蠅蛆,新鮮原料100公斤,用絞肉機絞碎,放入大型膠體磨研磨成勻漿,再加入100公斤蒸餾水攪拌置入加層升溫鍋,升溫至100度持續20分鐘,降溫用輸液泵過濾除去變性蛋白,再用微孔濾膜除去殘渣,再次超濾濃縮最后過層析柱,使其藥液中抗菌肽純度達98%。
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