[發明專利]人唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素,其編碼序列及用途

有效

• 申請號: 01105501.4
• 申請日: 2001-02-28
• 公開（公告）號: CN1371916A
• 公開（公告）日: 2002-10-02
• 發明（設計）人: 李楠;章衛平;曹雪濤
• 申請（專利權）人: 第二軍醫大學免疫學研究所
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/12;C12N15/63;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17
• 代理公司: 上海專利商標事務所
• 代理人: 徐迅

本發明屬于生物技術和醫學領域，具體地說，本發明涉及新的編碼人細胞表面識別和信號傳導分子sigelc-10多肽的多核苷酸，以及此多核苷酸編碼的多肽。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的用途和制備。本發明還涉及sigelc-10的唾液酸依賴性結合活性。具體地說，本發明的多肽是一種新的與細胞表面糖鏈識別、結合以及信號傳導有關的細胞表面蛋白。

唾液酸是一個具有九碳骨架的α-酮酸家族，多數存在于細胞表面糖蛋白和糖脂的寡糖側鏈遠端，暴露于細胞外環境中，在細胞與多種病原物質如病毒、細菌、原蟲和毒素的最初接觸中，糖鏈上的唾液酸被識別從而引發各種后續細胞生化事件。唾液酸的另一個重要作用是做為各種外源凝集素的配體。Siglecs(Sialic?acid-bindingIg-like?lectins，唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素)是一個隸屬于免疫球蛋白超家族(Immunoglobulin?superfamily，IgSF)的凝集素家族，通過識別唾液酸來介導蛋白-碳水化合物的相互作用。

迄今為止已經發現了該家族的9個成員：siglec-1/sialoadhesin、siglec-2/CD22、siglec-3/CD33、siglec-4a/myelin-associated?glycoprotein(MAG)、siglec-5、siglec-6/OBBP-1、siglec-7/AIRM1、siglec-8/SAF-2和siglec-9。這些蛋白均為一次跨膜的I型膜蛋白，在結構上包含胞外區，跨膜區和胞內區。胞外區由一個N端Ig?V-set結構域與不同數目的C2-set結構域構成。已經證明，第一個V-set?Ig樣結構域對于識別碳水化合物非常重要，而第二個Ig樣結構域有助于其結合活性。尤其是V-set結構域F股中的保守精氨酸，對所有Siglecs的唾液酸依賴性結合活性來說尤為重要。其他的保守殘基包括V-set結構域A和Gβ股中的芳香族氨基酸，N-乙酰神經氨酸中N-乙酰基及甘油側基結合。在所有Siglecs的V-set和臨近的C2-set結構域中均出現保守半胱氨酸異常排列，這些半胱氨酸形成了V-set結構域的片層內二硫鍵和V-set結構域與臨近的C2-set結構域間的二硫鍵。

隨著對Siglecs的結構和生物學功能研究的深入，人們發現Siglecs在多種生物學事件中均發揮重要功能。在大多數Siglecs的胞內區中都存在可能的酪氨酸磷酸化位點，位于基于酪氨酸的免疫受體抑制性基序(immunoreceptor?tyrosine-basedinhibitory?motif，ITIM)中。這些酪氨酸被磷酸化后，可以通過募集和活化細胞內磷酸酶(SHP-1、SHP-2或SHIP)來介導負調節信號。如siglec-3/CD33和siglec-7/AIRM1即可在特異性抗體交聯后傳導負調節信號；siglec-2/CD22的基因敲除實驗也證實其為B細胞活化的負調節物。

所有已知的Siglecs均表達于某一或某些特定的骨髓干細胞來源的細胞表面，如siglec-1/sialoadhesin表達在單核細胞上，siglec-2/CD22表達在B細胞上，siglec-3/CD33表達在髓系前體細胞上，siglec-7/AIRM1表達在NK細胞上，siglec-8/SAF-2表達在嗜酸性粒細胞上等等。Siglecs的這種局限性表達模式提示這些蛋白可能成為相應細胞類群分化的特異性表達標志，并參與腫瘤生長和轉移的調節作用。抗Siglecs的單克隆抗體(monoclonal?antibody，MoAb)可廣泛應用于白血病的免疫診斷及靶向性治療。siglec-3/CD33已經成為診斷急性髓系白血病(acute?myelogenousleukemia，AML)，尤其是未分化型的重要標志，同時可用于區分AML與淋巴系白血病。抗CD33單克隆抗體已經應用于治療AML的臨床一期研究，并可選擇性去除惡性造血，回復正常造血過程。

研究已表明，Siglecs家族蛋白與多種生命活動相關。因此，為診斷和治療目的研究和開發新的人唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素sigelc-10有重要意義。

本發明的目的是提供一種新的人唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素sigelc-10蛋白以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一目的是提供編碼這些多肽的多核苷酸。

本發明的另一目的是提供生產這些多肽的方法以及該多肽和編碼序列的用途。本發明的sigelc-10蛋白是一種Siglec同源分子。

本發明的另一個目的是提供sigelc-10的唾液酸依賴性結合活性。