[發明專利]新型轉錄因子BP1

無效

• 申請號: 00814096.0
• 申請日: 2000-08-14
• 公開（公告）號: CN1378552A
• 公開（公告）日: 2002-11-06
• 發明（設計）人: P·E·伯格
• 申請（專利權）人: 喬治華盛頓大學
• 主分類號: C07H21/04
• 分類號: C07H21/04;C12Q1/68;G01N33/53;C07K16/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 劉玥

本申請要求于1999年8月13日申請的第60/148,940號美國臨時申請的優先權。該臨時申請通過引用結合到本文中。

?????????????????關于聯邦資助研究的聲明

本文所述的研究得到NIH資助號R01DK53533的支持。美國政府在本發明中享有一定的權利。

????????????????????技術領域

本發明涉及編碼轉錄因子BP1的DNA、含有所述DNA的載體和含有所述DNA的宿主細胞。本發明也涉及編碼BP1的DNA的反義DNA或RNA、用于通過給予有效量BP1治療鐮狀細胞貧血的方法、以及用于篩選急性髓細胞白血病、急性淋巴細胞白血病和乳腺癌的方法。

(在所述臨時申請中，轉錄因子BP1有時稱為“BP1/Dlx9”或“BP1/D1x9”。在本文中，為了更加明確，將該轉錄因子簡稱為“BP1”。)

β-珠蛋白簇中的珠蛋白基因的表達局限于紅細胞生成細胞，在胚胎發育(ε)、胎兒發育(Gγ和Aγ)和成體發育(δ和β)期間表達5種不同的基因。珠蛋白基因的轉錄激活不僅由于轉錄激活蛋白與待激活基因的啟動子結合而發生，也由于位于β-珠蛋白簇上游6-18kb的調節元件-基因座控制區(LCR)而發生(參見例如Berg，P.E.和A.N.Schechter.1992.血紅蛋白疾病的分子遺傳學。載于T.Friedmann(編著)，Molecular?Genetic?Medicine.Academic?Press，San?Diego.；Forrester，W.C.，C.Thompson，J.T.Elder和Groudine，M.1986.人類β-珠蛋白基因簇中發育穩定的染色質結構。Proc.Natl.Acad.Sci.USA?83：1359-1363；和Tuan，D.，W.Soloman，Q.Li和I.M.London.1985.人類類紅細胞中的“β-樣珠蛋白”基因結構域.Proc。Natl.Acad.Sci.USA?82：6384-6388。)。個體發育期間β-珠蛋白簇基因的順序激活必定遇到特定發育階段期間無活性的珠蛋白基因的阻抑。阻抑由于阻抑蛋白與啟動子/上游DNA的結合所致，在成體β-珠蛋白基因的情況下，也可能由于缺乏LCR的激活作用所致(參見例如Crossley，M.和S.H.Orkin.1993.β-珠蛋白基因座的調節。Curr.Opinion?Gen.Dev.3：232-237。)。雖然對于與β-珠蛋白基因附近的DNA序列結合的轉錄激活蛋白的了解相當多，但對于阻抑其轉錄的蛋白質知之甚少。

如以下所討論的，已經表明BP1與β-珠蛋白基因上游的兩個沉默子DNA序列結合，因此有強有力的證據表明，BP1蛋白是一種β-珠蛋白基因的阻抑蛋白。本發明提供編碼BP1的DNA序列、使用得自所述DNA序列知識的信息篩選疾病例如乳腺癌、急性髓細胞白血病和急性淋巴細胞白血病的方法。已經發現所述DNA序列與其它兩種人類基因DLX4和DLX7密切相關，描述于Quinn，L.M.，B.V.Johnson，J.Nicholl，G.R.Sutherland和B.Kalionis.1997.從人類胎盤中分離和鑒定包括Distal-less家族新成員DLX4在內的同源框基因。Gene?187：55-61和Nakamura?S，Stock，DW，Wydner，KL，Bollekens?JA，Takeshita?K，Nagai?BM，Chiba，Kitamura?T，Freeland?TM，Zhao?Z，Minowada?J，Lawrence?JB，Weiss?KB和Ruddle?FH.一種新的哺乳動物Distal-less基因Dlx-7的基因組分析。Genomics?1996；38：314-324。

許多類型癌癥的存活率與早期檢測和治療相關。此外，監測進行之中的癌癥治療有助于確定有效性。因此，一直需要可靠的癌細胞篩選方法。一個篩選方法是檢測和監測與正常細胞相比特定類型癌細胞中過量表達或表達不足的基因的表達。檢測技術和具體標記已經公開于例如以下美國專利中：Smith等的美國專利第5,776,683號、Pardee等的美國專利第5,965,409號、Cole等的美國專利第6,037,129號、Holt等的美國專利第5,677,125號、Watson等的美國專利第6,004,756號、Mulshine等的美國專利第5,994,062號、Zon等的美國專利第5,700,927號和Rio等的美國專利第5,981,218號，上述專利通過引用結合到本文中。