[發(fā)明專利]可用于采用蛋白激酶Raf和Ras調(diào)節(jié)血管生成的方法和組合物

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00814095.2
• 申請日: 2000-08-11
• 公開（公告）號(hào): CN1378457A
• 公開（公告）日: 2002-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J·霍德;B·埃利塞里;D·A·徹雷斯
• 申請（專利權(quán)）人: 斯克里普斯研究學(xué)院
• 主分類號(hào): A61K38/00
• 分類號(hào): A61K38/00;B42D15/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 姜建成

相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求于2000年7月5日申請的美國臨時(shí)專利申請順序號(hào)60/215,951和于1999年8月13日申請的美國臨時(shí)專利申請順序號(hào)60/148,924的優(yōu)先權(quán)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明總的來講涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地說涉及用蛋白激酶Raf或Ras、Raf或Ras的變異體、采用調(diào)節(jié)Raf或Ras的試劑以及采用編碼所述激酶、變異體或試劑的核酸調(diào)節(jié)組織血管生成的方法和組合物。

背景

血管生成是一個(gè)涉及新血管生長到組織中的組織血管形成過程，也稱為新血管形成。該過程由內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞浸潤介導(dǎo)。據(jù)信該過程以下述三種方式中的任一種進(jìn)行：血管可以從現(xiàn)有的血管出芽、可以從前體細(xì)胞出現(xiàn)血管的從頭發(fā)育(血管發(fā)生)或現(xiàn)有的小血管的直徑可以增大。Blood等，Bioch.Biophys.Acta，1032：89-118(1990)。

血管生成是新生兒生長的一個(gè)重要過程，但在傷口愈合和包括組織炎癥、關(guān)節(jié)炎、腫瘤生長、糖尿病性視網(wǎng)膜病、特征為視網(wǎng)膜新血管形成的黃斑變性等病癥在內(nèi)的各種各樣臨床疾病的發(fā)病機(jī)理方面也是重要的。與血管生成有關(guān)的這些臨床表現(xiàn)被稱為血管生成性疾病。Folkman等，Science，235：442-447(1987)。血管生成在成體組織或成熟組織中一般不存在，雖然它在傷口愈合和黃體生長周期中確實(shí)發(fā)生。參見例如Moses等，Science，248：1408-1410(1990)。

已經(jīng)提出：對血管生成的抑制可能是限制腫瘤生長的一種有用的療法。已經(jīng)建議通過以下方式進(jìn)行對血管生成的抑制：(1)抑制“血管生成分子”例如bFGF(堿性成纖維細(xì)胞生長因子)的釋放，(2)中和血管生成分子，例如通過應(yīng)用抗bFGF抗體，(3)應(yīng)用玻連蛋白受體α_vβ₃的抑制劑，和(4)抑制內(nèi)皮細(xì)胞對血管生成刺激的應(yīng)答。這后一種策略已經(jīng)受到注意，F(xiàn)olkman等，Cancer?Biology，3：89-96(1992)已經(jīng)描述了一些內(nèi)皮細(xì)胞應(yīng)答的抑制劑，包括膠原酶抑制劑、基底膜更新(turnover)抑制劑、血管生成性類固醇、真菌來源的血管生成抑制劑、血小板因子4、血小板反應(yīng)蛋白、關(guān)節(jié)炎藥物例如D-青霉胺和金硫丁酸鹽(goldthiomalate)、維生素D₃類似物、α-干擾素和可以用來抑制血管生成的類似抑制劑。關(guān)于建議的其它血管生成抑制劑，參見Blood等，Bioch.Biophys?Acta.，1032：89-118(1990)，Moses等，Science，248：1408-1410(1990)，Ingber等，Lab.Invest.，59：44-51(1988)和美國專利第5,092,885、5,112,946、5,192,744、5,202,352、5,753,230和5,766,591號(hào)。然而，在前述參考文獻(xiàn)中沒有一種血管生成抑制劑涉及Raf蛋白。

為了發(fā)生血管生成，內(nèi)皮細(xì)胞必須首先降解，并且類似于腫瘤細(xì)胞在侵入和轉(zhuǎn)移形成期間所用的方式使血管基底膜交聯(lián)。

先前已經(jīng)報(bào)道了血管生成依賴于血管整聯(lián)蛋白和胞外基質(zhì)蛋白之間的相互作用。Brooks等，Science，264：569-571(1994)。此外，報(bào)道了生血管血管細(xì)胞的程序性細(xì)胞死亡(細(xì)胞凋亡)由所述相互作用起始，這可以用血管整聯(lián)蛋白α_vβ₃的某些拮抗劑來抑制。Brooks等，Cell，79：1157-1164(1994)。新近，已經(jīng)報(bào)道了可以用α_vβ₅的拮抗劑抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)與玻連蛋白受體(α_vβ₅)的結(jié)合，由此抑制所述蛋白酶的酶功能。Brooks等，Cell，85：683-693(1996)。

發(fā)明概要

本發(fā)明設(shè)計(jì)了在血管生成依賴于蛋白激酶Raf(在本文也通稱為Raf)活性的組織中對血管生成的調(diào)節(jié)。

設(shè)計(jì)了用于在與病癥相關(guān)的組織中調(diào)節(jié)血管生成的組合物和方法。將包含血管生成調(diào)節(jié)量的Raf蛋白的組合物給予待治療對血管生成的調(diào)節(jié)有反應(yīng)的病癥的組織。提供所述Raf蛋白的組合物可以含有純化蛋白、生物活性蛋白片段、重組產(chǎn)生的Raf蛋白或蛋白片段或融合蛋白、或用于表達(dá)Raf蛋白的基因/核酸表達(dá)載體。

在Raf蛋白被失活或被抑制的情況下，所述調(diào)節(jié)是對血管生成的抑制。在Raf蛋白有活性或被活化的情況下，所述調(diào)節(jié)是對血管生成的增強(qiáng)。