[發(fā)明專利]新的無白蛋白的因子Ⅷ制劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00806304.4
• 申請日: 2000-02-22
• 公開（公告）號: CN1399560A
• 公開（公告）日: 2003-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: M·貝斯曼;E·比約恩松;F·雅梅;R·卡施;M·皮拉;S·徹薩洛夫;J·卡彭特
• 申請（專利權(quán)）人: 巴克斯特國際有限公司;康涅狄格州大學
• 主分類號: A61K47/10
• 分類號: A61K47/10;A61K47/18;A61K47/02;A61K9/19;A61P7/04
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 郭廣迅

??????????????????本發(fā)明背景

因子VIII是在血漿中發(fā)現(xiàn)的導致凝血的級聯(lián)反應(yīng)中的輔助因子。血液中因子VIII活性量的缺乏可導致稱為甲型血友病的凝血障礙，一種主要影響男性的遺傳病。目前甲型血友病以因子VIII的療效性制劑治療，所述因子VIII制劑來源于人血漿或采用重組DNA技術(shù)制備。這些制劑或者針對急性出血(需要治療)給藥或者經(jīng)常性間隔給藥以防止失控性出血(預防)。

已知因子VIII在療效性制劑中相對不穩(wěn)定。在血漿中，因子VIII通常與另一種血漿蛋白，維勒布蘭得(von?Willebrand)因子(vWF)形成復合體，后者以大于因子VIII的摩爾量存在于血漿并且被認為可防止因子VIII的早熟降解。另一種循環(huán)血漿蛋白，白蛋白，可能也在體內(nèi)起到穩(wěn)定因子VIII的作用。因此目前市售的因子VIII組合物主要依靠采用白蛋白和/或vWF使因子VIII在制備過程和貯藏過程中保持穩(wěn)定。

目前應(yīng)用于市售的因子VIII組合物中的白蛋白和/或vWF來源于人血漿，然而，這些物質(zhì)的采用存在某些缺點。由于通常加入比因子VIII大的摩爾量的白蛋白以增加因子VIII在這些制劑中的穩(wěn)定性，因而這些制劑中因子VIII蛋白難以體現(xiàn)其自身特性。對重組制備的因子VIII組合物來說加入來源于人的白蛋白到因子VIII中也發(fā)現(xiàn)是有缺陷的。這是因為沒有這些另加的白蛋白時，重組來源的因子VIII組合物不會含有來源于人的蛋白，因此理論上的傳播病毒的危險應(yīng)當會減少。

配制不含白蛋白或vWF(或使用相對低水平的這些賦形劑)的因子VIII的幾種嘗試已有描述。例如，F(xiàn)reudenberg的美國專利No.5565427(EP?508194)(轉(zhuǎn)讓至Behringwerke)中描述的因子VIII組合物中，除賦形劑如氯化鈉和蔗糖外，還含有去污劑和氨基酸的特殊組合，特別是精氨酸和甘氨酸。所描述的去污劑，聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，以0.001至0.5％(v/v)間的量存在，而精氨酸和甘氨酸的存在量在0.01至1mol/L之間。所描述的蔗糖存在量在0.1至10％之間。該專利的實施例2提出了溶液中穩(wěn)定性不超過16小時的溶液(1)0.75％蔗糖、0.4M甘氨酸、和0.15M?NaCl，和(2)0.01M檸檬酸鈉、0.08M甘氨酸、0.016M賴氨酸、0.0025M氯化鈣、和0.4M氯化鈉，而溶液(3)1％蔗糖、0.14M精氨酸、0.1M氯化鈉以及(4)1％蔗糖、0.4M甘氨酸、0.14M精氨酸、0.1M氯化鈉、和0.05％吐溫80則呈現(xiàn)出穩(wěn)定性。

Nayer的美國專利No.5763401(歐洲專利818204)(轉(zhuǎn)讓至Bayer)也描述了不含白蛋白的治療用因子VIII制劑，其包括15-60mM蔗糖、最多50mM的NaCl、最多5mM的氯化鈣、65-400mM甘氨酸、以及最多50mM的組氨酸。下列特定制劑經(jīng)檢測是穩(wěn)定的：(1)150mMNaCl、2.5mM氯化鈣、和165mM甘露醇；和(2)1％蔗糖、30mM氯化鈉、2.5mM氯化鈣、20mM組氨酸、和290mM甘氨酸。發(fā)現(xiàn)一種糖含量較高的制劑(10％麥芽糖、50mM?NaCl、2.5mM氯化鈣、和5mM組氨酸)在冷凍干燥狀態(tài)下與制劑(2)相比呈現(xiàn)出較差的穩(wěn)定性。

Osterberg的美國專利No.5733873(歐洲專利627924)(轉(zhuǎn)讓至Pharmacia?&?Upjohn)公開的制劑中含有0.01-1mg/ml的表面活性劑。該專利公開的制劑中含有下列范圍內(nèi)的賦形劑：至少0.01mg/ml量的聚山梨醇酯20或80，優(yōu)選0.02-1.0mg/ml；至少0.1M?NaCl；至少0.5mM鈣鹽；和至少1mM組氨酸。更特殊地，下列特別實施例被公開：(1)14.7-50-65mM組氨酸、0.31-0.6M?NaCl、4mM氯化鈣、0.001-0.02-0.025％聚山梨醇酯80、有或無0.1％?PEG?4000或19.9mM蔗糖；以及(2)20mg/ml甘露醇、2.67mg/ml組氨酸、18mg/ml?NaCl、3.7mM氯化鈣、和0.23mg/ml聚山梨醇酯80。

其它采用低或高濃度氯化鈉的嘗試也被描述。Lee的美國專利No.4877608(歐洲專利315968)(轉(zhuǎn)讓至Rhone-Poulenc?Rorer)指出含相對低濃度氯化鈉的制劑，即制劑含有0.5mM-15mM?NaCl、5mM氯化鈣、0.2mM-5mM組氨酸、0.01-10mM賴氨酸鹽酸鹽和最多10％的糖。該“糖”可以是最多10％的麥芽糖、10％蔗糖、或5％甘露醇。