[發(fā)明專利]L－氨基酸生產(chǎn)菌以及用于生產(chǎn)L－氨基酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00806019.3
• 申請(qǐng)日: 2000-04-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1346402A
• 公開(kāi)（公告）日: 2002-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郡司義哉;安枝壽;杉本慎一;辻本信晴;島岡惠;宮田由理;大場(chǎng)麻奈美
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 味之素株式會(huì)社
• 主分類號(hào): C12N1/21
• 分類號(hào): C12N1/21;C12N1/32;C12N9/00;C12N15/52;C12P13/04
• 代理公司: 中國(guó)專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 劉玥

1.一種具有L-氨基酸生產(chǎn)能力的嗜甲基菌屬細(xì)菌(Methylophilusbacteria)。

2.按照權(quán)利要求1的嗜甲基菌屬細(xì)菌，其中所述L-氨基酸是L-賴氨酸、L-纈氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸或L-蘇氨酸。

3.按照權(quán)利要求1的嗜甲基菌屬細(xì)菌，它具有L-氨基酸類似物抗性或L-氨基酸輔源營(yíng)養(yǎng)(auxotrophy)。

4.按照權(quán)利要求1的嗜甲基菌屬細(xì)菌，其中L-氨基酸生物合成酶活性增強(qiáng)。

5.按照權(quán)利要求1的嗜甲基菌屬細(xì)菌，其中二氫吡啶二羧酸鹽合酶活性和天冬氨酸激酶活性增強(qiáng)，而且所述細(xì)菌具有L-賴氨酸生產(chǎn)能力。

6.按照權(quán)利要求1的嗜甲基菌屬細(xì)菌，其中二氫吡啶二羧酸鹽合酶活性增強(qiáng)，而且所述細(xì)菌具有L-賴氨酸生產(chǎn)能力。

7.按照權(quán)利要求1的嗜甲基菌屬細(xì)菌，其中天冬氨酸激酶活性增強(qiáng)，而且所述細(xì)菌具有L-賴氨酸生產(chǎn)能力。

8.按照權(quán)利要求5-7任一項(xiàng)的嗜甲基菌屬細(xì)菌，其中選自天冬氨酸半醛脫氫酶、二氫吡啶二羧酸鹽還原酶和二氨基庚二酸鹽脫羧酶中的1種、2種或3種酶的活性增強(qiáng)。

9.按照權(quán)利要求5的嗜甲基菌屬細(xì)菌，其中通過(guò)將編碼不受L-賴氨酸反饋抑制的二氫吡啶二羧酸鹽合酶的DNA以及編碼不受L-賴氨酸反饋抑制的天冬氨酸激酶的DNA導(dǎo)入細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用而增強(qiáng)所述二氫吡啶二羧酸鹽合酶活性和天冬氨酸激酶活性。

10.按照權(quán)利要求1的嗜甲基菌屬細(xì)菌，其中天冬氨酸激酶、高絲氨酸脫氫酶、高絲氨酸激酶和蘇氨酸合酶的活性增強(qiáng)，而且所述細(xì)菌具有L-蘇氨酸生產(chǎn)能力。

11.按照權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的細(xì)菌，其中所述嗜甲基菌屬細(xì)菌是食甲基嗜甲基菌。

12.一種生產(chǎn)L-氨基酸的方法，它包括在培養(yǎng)基中培養(yǎng) 1-11任一項(xiàng)定義的嗜甲基菌屬細(xì)菌，以便在培養(yǎng)物中產(chǎn)生并累積L-氨基酸，以及從所述培養(yǎng)物中收集所述L-氨基酸。

13.按照權(quán)利要求12的方法，其中所述培養(yǎng)基含有用作主要碳源的甲醇。

14.一種產(chǎn)生L-氨基酸含量提高的嗜甲基菌屬細(xì)菌的細(xì)菌細(xì)胞的方法，它包括在培養(yǎng)基中培養(yǎng)權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)定義的嗜甲基菌屬細(xì)菌，以便在所述細(xì)菌的細(xì)菌細(xì)胞中產(chǎn)生并累積L-氨基酸。

15.按照權(quán)利要求14的產(chǎn)生所述嗜甲基菌屬細(xì)菌的細(xì)菌細(xì)胞的方法，其中所述L-氨基酸是L-賴氨酸、L-纈氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸或L-蘇氨酸。

16.一種編碼以下(A)或(B)定義的蛋白的DNA：

(A)具有SEQ?ID?NO：6的氨基酸序列的蛋白，或

(B)具有包括一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的取代、缺失、插入、添加或倒位的SEQ?ID?NO：6的氨基酸序列而且具有天冬氨酸激酶活性的蛋白。

17.按照權(quán)利要求16的DNA，它為以下(a)或(b)定義的DNA：

(a)具有包含SEQ?ID?NO：5第510-1736號(hào)核苷酸的核苷酸序列的核苷酸序列的DNA；或

(b)在嚴(yán)格條件下可與具有SEQ?ID?NO：5第510-1736號(hào)核苷酸的核苷酸序列或其部分的探針雜交，而且編碼具有天冬氨酸激酶活性的蛋白的DNA。

18.一種編碼以下(C)或(D)定義的蛋白的DNA：

(C)具有SEQ?ID?NO：8的氨基酸序列的蛋白，或

(D)具有包括一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的取代、缺失、插入、添加或倒位的SEQ?ID?NO：8的氨基酸序列而且具有天冬氨酸半醛脫氫酶活性的蛋白。

19.按照權(quán)利要求18的DNA，它為以下(c)或(d)定義的DNA：

(c)具有包含SEQ?ID?NO：7第98-1207號(hào)核苷酸的核苷酸序列的核苷酸序列的DNA；或

(d)在嚴(yán)格條件下可與具有SEQ?ID?NO：7第98-1207號(hào)核苷酸的核苷酸序列或其部分的探針雜交，而且編碼具有天冬氨酸半醛脫氫酶活性的蛋白的DNA。