[發(fā)明專利]控制脂質(zhì)體大小的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00803507.5
• 申請(qǐng)日: 2000-02-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1338923A
• 公開(kāi)（公告）日: 2002-03-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J·L·斯萊特;A·A·澤特;G·Z·朱
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 阿爾扎有限公司
• 主分類號(hào): A61K9/127
• 分類號(hào): A61K9/127;A61K9/133
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 余穎

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種制備脂質(zhì)體組合物的方法，由此可控制所得脂質(zhì)體的大小。本發(fā)明還涉及用所述方法制得的組合物。

發(fā)明背景

脂質(zhì)體是一種球形含水顆粒，至少包有一層全閉合的脂質(zhì)雙層，其粒徑通常約70-1000nm。在最近十年中，脂質(zhì)體已成為重要的藥物和化妝品載體。根據(jù)這些試劑的親水性，它們被包含在含水區(qū)室內(nèi)或結(jié)合在脂質(zhì)體的脂質(zhì)雙層中。

脂質(zhì)體的制備方法是已知技術(shù)。多層微泡(即具有一層以上脂質(zhì)雙層的脂質(zhì)體)的最簡(jiǎn)便的制備方法是通過(guò)減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將成微泡脂質(zhì)從有機(jī)溶劑中沉積到燒瓶壁上形成一層薄膜。加入水性緩沖液，進(jìn)行脂質(zhì)的水合，水合的溫度高于脂質(zhì)或混合脂質(zhì)中晶體熔點(diǎn)最高組分的晶體熔點(diǎn)。在加入水性緩沖液的同時(shí)進(jìn)行攪拌，例如攪動(dòng)，超聲處理，渦流攪拌，從而獲得脂質(zhì)體懸浮液。

脂質(zhì)體形成后，對(duì)脂質(zhì)體的大小進(jìn)行處理，以獲得較小且/或大小分布較均勻的顆粒。制定大小的常用方法之一是通過(guò)一系列選定大小的過(guò)濾器擠出脂質(zhì)體懸浮液。也可用超聲處理懸浮液，使脂質(zhì)體碎裂成較小的顆粒，由此制定脂質(zhì)體的大小。

大小單層微泡(LUV和SUV)是只有一層脂質(zhì)雙層的脂質(zhì)體，可用許多方法來(lái)制備。SUV的粒徑通常在20-50nm，可通過(guò)將脂質(zhì)的乙醇稀溶液迅速注入水相來(lái)制備，這又稱乙醇注射法。制備SUV的另一種方法是對(duì)多層微泡進(jìn)行劇烈超聲處理。較大的多層微泡的大小可能為幾百納米至數(shù)微米，通常用反相蒸發(fā)法制備，該方法中，由有機(jī)溶劑形成油包水脂質(zhì)乳液，然后減壓蒸發(fā)去除緩沖液和有機(jī)溶劑。

發(fā)明概述

本發(fā)明目的之一是提供一種制備所需粒徑脂質(zhì)體的方法。

本發(fā)明的目的還在于提供一種制備所需大小脂質(zhì)體的方法。

本發(fā)明的目的還在于提供一種通過(guò)選擇水合組合物的組成來(lái)控制脂質(zhì)體大小的方法。

內(nèi)容之一，本發(fā)明包括一種獲得所需大小脂質(zhì)體顆粒的方法。該方法包括用第二溶劑水合溶于溶脂溶劑中的成微泡脂質(zhì)，形成含10-50重量％溶脂溶劑的水合混合物。溶脂溶劑的量根據(jù)所需顆粒大小來(lái)選擇，水合混合物中該量的溶脂溶劑與所述第二溶劑可溶混。

實(shí)施例之一中，所述溶脂溶劑是醇，例如甲醇，乙醇和丁醇。

實(shí)施例之一中，所述成微泡脂質(zhì)是帶電的成微泡脂質(zhì)，例如陽(yáng)離子脂質(zhì)DODAC和陰離子脂質(zhì)DSPE。另一實(shí)施例中，成微泡脂質(zhì)是中性的。

實(shí)施例之一中，水合還包括水合以親水性聚合物鏈，例如聚乙二醇衍生的成微泡脂質(zhì)。

優(yōu)選實(shí)施例之一中，本發(fā)明方法中的第二溶劑以水為佳。

另一實(shí)施例中，水合包括用第二溶劑水合一種藥物。水合還可以包括用溶脂溶劑水合藥物。

在一優(yōu)選實(shí)施例中，所述藥物是以一條以上酰基鏈衍生的放射致敏劑。優(yōu)選的放射致敏劑是二棕櫚酰5-碘-2-脫氧尿苷。

一實(shí)施例中，所述藥物是核酸。

本發(fā)明的內(nèi)容還包括按以上方法制得的脂質(zhì)體組合物，其中還包含藥物。

本發(fā)明還包括獲得最小粒徑脂質(zhì)體的方法：將成微泡脂質(zhì)溶于溶脂溶劑；加入第二溶劑使得溶脂溶劑含量為10-50重量％，所述溶脂溶劑量的選擇應(yīng)使所得脂質(zhì)體小于用類似配方但溶脂溶劑含量在所述范圍之外的所得。

本發(fā)明還包括一種確定脂質(zhì)體組合物組成從而獲得選定大小脂質(zhì)體的方法。該方法包括將成微泡脂質(zhì)溶于溶脂溶劑；用一定量第二溶劑水合該脂質(zhì)，形成脂質(zhì)體懸浮液。測(cè)量懸浮液中脂質(zhì)體的粒徑，重復(fù)水合和測(cè)量步驟，得出脂質(zhì)體粒徑與溶脂溶劑量之間的關(guān)系曲線。根據(jù)這一關(guān)系曲線選擇獲得選定脂質(zhì)體粒徑所需的溶脂溶劑量。

以下是對(duì)本發(fā)明的詳細(xì)描述，結(jié)合附圖，將對(duì)本發(fā)明的以上及其他目的和特征有更全面的理解。

???????????????????????????附圖簡(jiǎn)述

圖1A-B是用雞蛋卵磷脂，膽固醇，氯化N，N-二油酰基-N，N-二甲基銨(DODAC)和分子量2000Da聚乙二醇衍生的神經(jīng)酰胺(C₂₀PEG-神經(jīng)酰胺)制備的脂質(zhì)體懸浮液，并含包被寡核苷酸，各懸浮液的組成顯示在相圖1A，各懸浮液內(nèi)脂質(zhì)體的平均粒徑(nm)顯示在圖1B中，表現(xiàn)為脂質(zhì)重量％和乙醇重量％兩者的函數(shù)關(guān)系。

圖2A-B是用部分氫化的大豆卵磷脂，膽固醇，DODAC和mPEG衍生的中性脂質(zhì)(mPEG-DS)制備的脂質(zhì)體懸浮液，并含包被寡核苷酸，各懸浮液的組成顯示在相圖2A，各懸浮液內(nèi)脂質(zhì)體的平均粒徑(nm)顯示在圖2B中，表現(xiàn)為脂質(zhì)重量％和乙醇重量％兩者的函數(shù)。