[發明專利]綠膿毒素基因及其包裝與導向蛋白復合物對癌的靶向基因治療

無效

• 申請號: 00137116.9
• 申請日: 2000-12-28
• 公開（公告）號: CN1361285A
• 公開（公告）日: 2002-07-31
• 發明（設計）人: 盧圣棟;郭蕾;李勇;方華圣;陳偉京;王俊;洪梅;路金芝;張樹政
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12N15/79;C12N15/62;C07K14/195;A61K48/00
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司
• 代理人: 林曉紅

1、編碼經突變改型的綠膿桿菌毒素第III結構域的重組DNAPEIIImut，其具有如下核苷酸序列：ATGCTCGGCGACGGCGGCGACGTCAGCTTCAGCACCCGCGGCACGCAGAACTGGACGGTGGAGCGGCTGCTCCAGGCGCACCGCCAACTGGAGGAGCGCGGCTATGTGTTCGTCGGCTACCACGGCACCTTCCTCGAAGCGGCGCAAAGCATCGTCTTCGGCGGGGTGCGCGCGCGCAACCAGGACCTCGACGCGATCTGGCGCGGTTTCTATATCGCCGGCGATCCGGCGCTGGCCTACGGCTACGCCCAGGACCAGGAACCCGACGCACGCGGCCGGATCCGCAACGGTGCCCTGCTGCGGGTCTATGTGCCGCGCTCGAGCCTGCCGGGCTTCTACCGCACCAGCCTGACCCTGGCCGCGCCGGAGGCGGCGGGCGAGGTCGAACGGCTGATCGGCCATCCGCTGCCGCTGCGCCTGGACGCCATCACCGGCCCCGAGGAGGAAGGCGGGCGCCTGGAGACCATTCTCGGCTGGCCGCTGGCCGAGCGCACCGTGGTGATTCCCTCGGCGATCCCCACCGACCCGCGCAACGTCGGCGGCGACCTCGACCCGTCCAGCATCCCCGACAAGGAACAGGCGATCAGCGCCCTGCCGGACTACGCCAGCCAGCCCGGCAAACCGCCGAAGGACGAACTGTAA

2、由權利要求1的重組DNA?PEIIImut編碼的蛋白質，具有如下氨基酸序列：MLGDGGDVSFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYVFVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGALLRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLAERTVVIPSAIPTDPRNVGGDLDPSSIPDKEQAISALPDYASQPGDPPKDEL

3、含有權利要求1的重組DNA?PEIIImut的真核表達型重組體。

4、權利要求3的真核表達型重組體，其為質粒pcDNA(3.1)-PEIIImut，所述質粒以包含于大腸桿菌中的形式保藏在中國微生物保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC?No.0478。

5、一種融合基因，從5’到3’依次包括編碼人類組蛋白H1第115位-第221位的106個氨基酸的核苷酸序列和編碼人類表皮生長因子C環的最后22個氨基酸的核苷酸序列，其具有如下核苷酸序列：GAAGGCAAACCCAAGGCCAAAAAGGCTGGCGCAGCCAAGCCTAGGAAGCCTGCTGGGGCAGCCAAGAAGCCCAAGAAGGTGGCTGGCGCCGCTACCCCCAAGAAAAGCATCAAAAAGACTCCTAAGAAGGTAAAGAAGCCAGCAACCGCTGCTGGGACCAAGAAAGTGGCCAAGAGTGCGAAAAAGGTGAAAACACCTCAGCCAAAAAAAGCTGCCAAGAGTCCAGCTAAGGCCAAAGCCCCTAAGCCCAAGGCGGCCAAGCCTAAGTCGGGGAAGCCGAAGGTTACAAAGGCAAAGAAGGCAGCTCCGAAGAAAAAGAATTCTAACTGTGTTGTTGGTTACATCGGTGAAAGATGTCAATACAGAGACTTGAAGTGGTGGGAATAATGA

6、含有權利要求5的融合基因的表達型重組體，其為MFLII，圖譜見圖5。

7、用權利要求6的表達型重組體轉化的畢赤酵母細胞，其為巴氏畢赤酵母/KM71/MFLII，該細胞保藏在中國微生物保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC?No.0476。