[發明專利]重組人甲狀旁腺素基因的合成及表達

有效

• 申請號: 00133573.1
• 申請日: 2000-11-13
• 公開（公告）號: CN1353115A
• 公開（公告）日: 2002-06-12
• 發明（設計）人: 黃秀東;游自立;李樹剛;王立兵
• 申請（專利權）人: 梅伯皋
• 主分類號: C07K14/635
• 分類號: C07K14/635;C12N15/16;C12N15/63;C12N15/79
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.合成如下一段含人甲狀旁腺素(簡稱hPTH)基因的DNA序列：5`-GCTGGATCCGATGACGATGACAAGTCAGTTTCTGAAATTCAACTTATGCATAATCTTGGTAAGCATCTTAATTCTATGGAACGTGTTGAATGGCTTCGTAAGAAGCTTCAAGATGTCCATAATTTTGTTGCTCTTGGTGCTCCTCTTGCTCCTCGTGATGCTGGTTCTCAACGTCCTCGTAAGAAGGAAGATAATGTTCTTGTTGAGTCTCATGAAAAGTCTCTTGGTGAAGCTGATAAGGCTGATGTCAATGTTCTTACAAAGGCTAAGTCTCAATAGAATTCTGCAGTGA-3`

2.根據權利要求1，該段DNA序列的特征是其5`-端含有限制酶BamHI的識別序列，3`-端含有限制酶EcoRI、PstI的識別序列，尤其在其5`-端含有編碼腸激酶識別的氨基酸序列(DDDDK)對應得DNA序列；

3.根據權利要求1，可以將合成的人甲狀旁腺素基因插入由Lac或Tac或AOX1啟動子控制的不同表達載體中。如pGEX、pTrx、pPIC9、pHIL-S1等；

4.根據權利要求1、2所述hPTH基因的5`-端DDDDK對應的DNA序列也可以替換成重組TEV蛋白酶識別的氨基酸序列(ENLYFQG/S)所對應得DNA序列，從而產生同天然hPTH完全一樣或僅N-端第一位氨基酸改變成甘氨酸(Gly)的hPTH衍生物；

5.根據權利要求4，hPTH多肽的N-端第一位可以替換成甘氨酸(Gly)；

6.根據權利要求1、2、3、4，含有該基因的原核或真核表達宿主細胞。