[發明專利]單唾液酸四己糖神經節苷脂的高純度制備工藝

無效

• 申請號: 00133077.2
• 申請日: 2000-11-09
• 公開（公告）號: CN1353112A
• 公開（公告）日: 2002-06-12
• 發明（設計）人: 范開;王建;馬素永;張益;田峰;聶李亞;黃洪濤
• 申請（專利權）人: 重慶富進生物醫藥有限公司
• 主分類號: C07H15/10
• 分類號: C07H15/10;C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.本專利中單唾液酸四己糖神經節苷脂(GM1)的高純度制備工藝特征在于：用有機溶劑混合物從哺乳動物腦組織中提取總神經節苷脂，然后對總神經節苷脂提取液濃縮后進行酸水解以提高GM1含量，濃縮水解產物經脫鹽后溶解于有機溶劑混合物中進行陰離子交換柱層析，收集含GM1的洗脫峰，濃縮后再進行反相柱層析。所得GM1于冷丙酮中沉淀，得純度大于98％的GM1干粉。

2.根據權利要求1所述方法，其特征在于提取總神經苷脂所用有機溶劑混合物是氯仿-甲醇-水。提取總脂時其體積比例是：氯仿-甲醇-水，1∶2∶0.75，分離總神經節苷脂時其體積比例調節到：氯仿-甲醇-水，1∶2∶1?4，腦組織與有機溶劑比例為1∶20(v/v)。

3.根據權利要求1所述方法，其特征在于酸水解的條件是用無機酸將總神經節苷脂水溶液pH調節到3.0-5.0，加熱溫度至80-100℃、水解時間2h。

4.根據權利要求1所述方法，其特征在于所用離子交換介質為Q-Sepharose或DEAE-Sepharose型。

5.根據權利要求4所述方法，其特征在于所用離子交換介質Q-SepharoseF.F.層析條件為：

(1).上樣條件：

a柱子用氯仿-甲醇-水，30∶60∶8，(v/v/v)，平衡到電導率小于50us.cm^-1；

b.樣品溶解于氯仿-甲醇-水，30∶60∶8，(v/v/v)，電導率小于100us?cm^-1，pH為8.0；

(2)洗脫條件：

a.氯仿-甲醇-水，30∶60∶8，(v/v/v)，(0.015M乙酸鈉)，洗脫GM1；

b.氯仿-甲醇-水，30∶60∶8，(v/v/v)，(0.2M乙酸鈉)，洗脫非GM1神經節苷脂。

6.根據權利要求1所述方法，其特征在于所用反相介質為Sourse?RPC?30。

7.根據權利要求6所述方法，其特征在于減壓濃縮后GM1溶于含30％正丙醇的水溶液中，加入乙酸鈉定終濃度0.8M，再用NaOH調PH9.0，37℃中1小時后上樣SourcRPC30反相柱，經水相洗脫后，用甲醇-水緩沖液(2∶1)洗脫下GM1。