[發明專利]一種端粒酶活性檢測方法

無效

• 申請號: 00127583.6
• 申請日: 2000-11-28
• 公開（公告）號: CN1298951A
• 公開（公告）日: 2001-06-13
• 發明（設計）人: 陳燃;毛裕民
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C12Q1/25
• 分類號: C12Q1/25;C12Q1/68
• 代理公司: 復旦大學專利事務所
• 代理人: 陸飛

本發明屬生物工程技術和分子檢測技術領域，是一種端粒酶(Telomerase)活性檢測方法。

端粒酶是一種核糖核酸蛋白，具有逆轉錄酶的活性，可以用自身的RNA組分作為模板，合成端粒重復DNA序列。永生細胞和復制活躍的細胞，以及絕大多數的惡性腫瘤具有端粒酶活性，而正常的體細胞和組織沒有該活性。端粒酶活性的檢測對于研究細胞衰老、癌變，及腫瘤病理和診治，有很重要的意義。大量的研究發現，端粒酶活性檢測，可以作為癌癥的早期檢測和預后手段，并可作為對病人監測的一種標記。許多從細胞或組織病理學觀察屬于癌前的病灶，可檢測到端粒酶活性，這表明這些看似良性的病灶，可能已經包含少量的惡變細胞。對于前列腺組織，當前的標記不能區分良性增生與前列腺癌，而端粒酶活性明顯能夠區分。因為缺乏有效的細胞學標記，大約50％的早期膀胱癌病例錯過早期確診，而采用損害少的活體檢查技術在大多數(約90％)的膀胱癌能夠檢出端粒酶活性。這些發現說明，結合常規的細胞學方法，端粒酶活性的檢測可能是一種重要的早期癌癥診斷方法。另外一些研究提出端粒酶活性的檢出，預示臨床治療效果不佳：手術上認為是正常組織的癌旁組織，可檢出端粒酶的比率超過10％。這因為原發性腫瘤能侵入周圍的正常組織，雖然由于其中只有很少量的癌細胞而在病理上沒有表現。在一些可供檢測的標記很少的腫瘤，比如腦膜瘤(meningiomas)，端粒酶活性可能給臨床提供其病程進展的一種客觀參照，而在胃癌、結腸癌、膀胱癌、神經母細胞瘤和甲狀腺癌，都發現端粒酶可能分辨癌癥的不同階段。另外，取樣的容易與否是臨床診斷應用必須考慮的。端粒酶活性可以從非常少的樣品中檢出增加了其作為標記的實用性。細胞學取樣的常用方法適用于端粒酶檢測。比如：病人組織穿刺活檢、來源于口腔清洗液、尿液、肺或腸灌洗液等的脫落細胞。通過檢測其端粒酶活性，可以監測和判斷癌變進程。(Kim?NW,et?al.Science,1994,266:2011～2015;Hiyama?E,et?al.Cancer?Res,1995,55:3258～3262;Shay?JW,WrightWE.Curr?Opin?Oncol,1996,8:66～71;Yoshida?K,et?al.Cancer,1997,79:362～369;UmbrichtCB,et?al.Cancer?Res,1997,57:2144～2147;Langford?LA,et?al.Hum?Pathol,1997,28:416～420;Jong?HS,et?al.Cancer,1999,86:559～565)。