[發(fā)明專利]一種人脫氫酶亞基蛋白異構體及其編碼序列無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 00116224.1 | 申請日: | 2000-05-30 |
| 公開(公告)號: | CN1278001A | 公開(公告)日: | 2000-12-27 |
| 發(fā)明(設計)人: | 許志剛;肖華勝;康波愈;宋懷東;陳竺;韓澤廣 | 申請(專利權)人: | 國家人類基因組南方研究中心 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07K14/435;C07K16/18;C07H21/00;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 復旦大學專利事務所 | 代理人: | 陸飛 |
| 地址: | 201203 上海市*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 脫氫酶 蛋白 異構體 及其 編碼 序列 | ||
1.一種分離出的DNA分子,其特征在于,它包括:編碼具有人hNDS4-iso蛋白質活性的多肽的核苷酸序列,而且所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO.6中從核苷酸第628-1077位的核苷酸序列有至少70%的同源性;或者所述的核苷酸序列能在中度嚴緊條件下與SEQ?ID?NO.6中從核苷酸第628-1077位的核苷酸序列雜交。
2.如權利要求1所述的DNA分子,其特征在于,所述的序列編碼具有SEQ?ID?NO.7所示的氨基酸序列的多肽。
3.如權利要求1所述的DNA分子,其特征在于,該序列具有SEQ?ID?NO.6中從核苷酸第628-1077位的核苷酸序列。
4.一種分離出的人hNDS4-iso蛋白多肽,其特征在于,它包括:具有SEQ?ID?NO.7氨基酸序列的多肽、或其保守性變異多肽、或其活性片段,或其活性衍生物。
5.如權利要求4所述的多肽,其特征在于,該多肽是具有SEQ?ID?NO.7序列的多肽。
6.一種載體,其特征在于,它包含權利要求1所述的DNA。
7.一種用權利要求6所述載體轉化的宿主細胞,其特征在于它包括原核細胞和真核細胞。
8.一種產(chǎn)生具有人hNDS4-iso蛋白質活性的多肽的方法,特征在于其步驟如下:
(1)將編碼具有人hNDS4-iso蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地連于表達調控序列,形成人hNDS4-iso蛋白表達載體,所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO.6中從核苷酸第628-1077位的核苷酸序列有至少70%的同源性;
(2)將步驟(1)中的表達載體轉入宿主細胞,形成人hNDS4-iso蛋白的重組細胞;
(3)在適合表達人hNDS4-iso蛋白多肽的條件下,培養(yǎng)步驟(2)中的重組細胞;
(4)分離出具有人hNDS4-iso蛋白活性的多肽。
9.一種能與權利要求7所述的人hNDS4-iso蛋白多肽特異性結合的抗體,其特征在于它包括多克隆抗體和單克隆抗體。
10.一種核酸分子,其特征在于,它包含權利要求1所述的DNA分子中8-100個連續(xù)核苷酸。
11.一種用于檢測樣品中是否存在人hNDS4-iso核苷酸序列的方法,其特征在于它包括用權利要求10所述探針與樣品進行雜交,然后檢測探針是否發(fā)生了結合,該樣品是PCR擴增后的產(chǎn)物,其中PCR擴增引物對應于人hNDS4-iso核苷酸編碼序列,并可位于該編碼序列的兩側或中間,引物長度為15~50個核苷酸。
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