[發(fā)明專利]新的血管生長素衍生蛋白及其編碼序列在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 00115679.9 | 申請日: | 2000-05-15 |
| 公開(公告)號(hào): | CN1277208A | 公開(公告)日: | 2000-12-20 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 毛裕民;謝毅;黃盛東 | 申請(專利權(quán))人: | 上海博容基因開發(fā)有限公司 |
| 主分類號(hào): | C07K14/435 | 分類號(hào): | C07K14/435;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;A61K38/17;A61P9/00 |
| 代理公司: | 上海專利商標(biāo)事務(wù)所 | 代理人: | 徐迅 |
| 地址: | 200092 上海市*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 血管 生長素 衍生 蛋白 及其 編碼 序列 | ||
1.一種分離的血管生長素衍生蛋白,其特征在于,它包含Asp116His突變。
2.如權(quán)利要求1所述的蛋白,其特征在于,該蛋白是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。
3.一種分離的多核苷酸,其特征在于,該多核苷酸編碼具有SEQ?ID?NO:2所示氨基酸序列的多肽。
4.如權(quán)利要求3所述的多核苷酸,其特征在于,該多核苷酸具有SEQ?ID?NO:1所示的序列。
5.一種載體,其特征在于,它含有權(quán)利要求3所述的多核苷酸。
6.一種遺傳工程化的宿主細(xì)胞,其特征在于,它是選自下組的一種宿主細(xì)胞:
(a)用權(quán)利要求5所述的載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞;
(b)用權(quán)利要求3所述的多核苷酸轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞。
7.一種血管生長素衍生蛋白的制備方法,其特征在于,該方法包含:
(a)在適合表達(dá)血管生長素衍生蛋白的條件下,培養(yǎng)權(quán)利要求6所述的宿主細(xì)胞;
(b)從培養(yǎng)物中分離出血管生長素衍生蛋白。
8.如權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,該方法還包括如下復(fù)性步驟:
將分離的血管生長素衍生蛋白濃度調(diào)整到不高于10mg/ml,加入等體積的無菌甘油,混合均勻,移入截留分子量6000-8000的透析袋中,在4℃對100倍體積的蛋白復(fù)性透析液緩慢透析24小時(shí),再在4℃下對10-15倍體積的蛋白復(fù)性稀釋液緩慢透析24小時(shí),然后濃縮,其中蛋白復(fù)性透析液是50mmol/LTris-HCl,pH8.5,100mmol/LNaCl溶液和無菌甘油的1∶3混合液,而蛋白復(fù)性稀釋液含50mmol/LTris-HCl,pH8.5,100mmol/L?NaCl。
9、一種藥物組合物,其特征在于,它含有安全有效量的權(quán)利要求1所述的血管生長素衍生蛋白以及藥學(xué)上可接受的載體。
10.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物,其特征在于,該蛋白是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。
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