[發(fā)明專利]生物芯片檢測(cè)中的分子放大

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00111984.2
• 申請(qǐng)日: 2000-03-10
• 公開（公告）號(hào): CN1313404A
• 公開（公告）日: 2001-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李民乾;李賓;周志東
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院上海原子核研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 上海華東專利事務(wù)所
• 代理人: 張澤純

1、一種用于生物芯片檢測(cè)的生物芯片雜交信號(hào)分子放大，包括：將樣品單鏈DNA加入到DNA芯片中進(jìn)行雜交反應(yīng)，清洗和檢測(cè)，其特征在于所說(shuō)的樣品單鏈DNA加入到DNA芯片中要通過(guò)雜交前方法或雜交后方法，將熒光微球特異地連接到DNA芯片上雜交的雙鏈DAN上。

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物芯片雜交信號(hào)分子放大，其特征在于所說(shuō)的雜交前方法的主要步驟是：

(1)先對(duì)樣品單鏈DNA進(jìn)行處理，使其帶有活性基團(tuán)；

(2)與DNA芯片雜交；

(3)用沖洗液沖洗；

(4)將帶有相應(yīng)活性基團(tuán)的熒光微球與已雜交的DNA芯片上活性基團(tuán)作用，將熒光微球連接到DNA雙鏈上。

3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物芯片雜交信號(hào)分子放大，其特征在于所說(shuō)的處理是生物素化處理，使樣品單鏈DNA帶有生物素活性基團(tuán)，將帶有親和素的熒光微球與已雜交的DNA芯片上相對(duì)應(yīng)的生物素作用，將熒光微球連接到DNA雙鏈上。

4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物芯片雜交信號(hào)分子放大，其特征在于所說(shuō)的處理是氨基化，使樣品單鏈DNA帶有氨基活性基團(tuán)，將帶有羧基活性基團(tuán)的熒光微球與已雜交的DNA芯片上相對(duì)應(yīng)的氨基作用，將熒光微球連接到DNA雙鏈上。

5、根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物芯片雜交信號(hào)分子放大，其特征在于所說(shuō)的處理是地高辛化，再將帶有地高辛抗體的熒光微球連接到已雜交的雙鏈DNA上。

6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物芯片雜交信號(hào)分子放大，其特征在于所說(shuō)的雜交后方法的步驟如下：

(1)樣品單鏈DNA與DNA芯片雜交；

(2)雜交后利用含有游離伯氨基的補(bǔ)骨脂素衍生物特異性地嵌入到已雜交的DNA雙鏈內(nèi)；

(3)沖洗掉少量的與單鏈DNA非共價(jià)結(jié)合的補(bǔ)骨脂素衍生物；

(4)用365納米波長(zhǎng)的紫外光照射后，補(bǔ)骨脂素衍生物可與DNA雜交雙鏈形成牢固的共價(jià)鏈結(jié)合；

(5)補(bǔ)骨脂素衍生物又可通過(guò)連接劑二硫雙(N-羥基-琥珀酰亞胺丙酸)酯連接含有活性基團(tuán)的熒光微球，或通過(guò)與N-羥基-琥珀酰亞胺氨基己酸酯連接的生物素共價(jià)交聯(lián)后再與帶親和素的熒光微球連接，或直接與帶有活性羧基的熒光微球連接。