[發(fā)明專利]用新的復(fù)性方法制備重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00111220.1
• 申請(qǐng)日: 2000-07-19
• 公開（公告）號(hào): CN1334271A
• 公開（公告）日: 2002-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王革
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 王革
• 主分類號(hào): C07K14/48
• 分類號(hào): C07K14/48;A61K38/18;A61P25/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1、用一種新的復(fù)性方法制備重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子(簡(jiǎn)稱rhNGF)。其特征在于在變性rhNGF的復(fù)性體系中加入二硫鍵異構(gòu)酶，以提高rhNGF的復(fù)性率。

2、重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子(rhNGF)的制備工藝，其特征在于經(jīng)過工程菌表達(dá)→菌體破碎→包含體分離→變性→PDI催化復(fù)性→脫鹽→陽離子交換層析等步驟完成。

3、如權(quán)利要求2所述的重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子(rhNGF)的變性，其特征在于用尿素作為變性劑，變性體系含1～10M尿素，5～50mM?Tris，0.5～5mM?EDTA，pH7～10。

4、如權(quán)利要求2所述的PDI催化的重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子(rhNGF)的復(fù)性，其特征在于PDI為重組人PDI或其它來源的PDI，rhNGF與PDI的摩爾比為100∶1～10∶1。

5、如權(quán)利要求2所述的陽離子交換層析，其特征在于采用CM-Sepharose陽離子交換柱，洗脫條件是0～1M?NaCl，pH4～8，最佳洗脫濃度是0.3～0.4M?NaCl。