[發明專利]圈卷產色鏈霉菌變株及其培養方法和應用

在審

• 申請號: 00105881.9
• 申請日: 2000-04-14
• 公開（公告）號: CN1269404A
• 公開（公告）日: 2000-10-11
• 發明（設計）人: 駱愛群;宋幼新;劉志恒
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N15/01;C12N13/00;//;C12R1465)
• 代理公司: 北京三友專利代理有限責任公司
• 代理人: 劉朝華

1、一種圈卷產色鏈霉菌變株，其特征在于：通過化學誘變劑、紫外線照射、衛星搭載和高能等離子輻射復合處理中的一種或兩種以上聯合處理孢子液，培養出的圈卷產色鏈霉素菌變株，保藏號為CGMCC?NO0446，分類命名為“圈卷產色鏈霉菌種Streptomyces?ansochromogenus”。

2、如權利要求1所述的圈卷產色鏈霉菌變株，其特征在于：該化學誘變劑為N-甲基-N’-硝基-亞硝基胍，使用濃度為120微克-300微克；

3、如權利要求1所述的圈卷產色鏈霉菌變株，其特征在于：該紫外線誘變處理為在紫外燈下照射30-300秒，避光進行紫外線誘變處理；

4、如權利要求1所述的圈卷產色鏈霉菌變株，其特征在于：該衛星搭載和高能等離子輻射復合處理為先將孢子液置于安培管及微生物培養箱內，在衛星搭載艙內隨衛星搭載，再置于高能等離子發生器內進行輻射誘變處理5-90秒鐘。

5、一種圈卷產色鏈霉菌變株的培養方法，其特征在于：具體步驟如下：

(1)孢子液的制備：先將鏈霉菌的菌種接種到斜面培養基中，培養基為高氏一號或葡萄糖-天門冬素培養基，裝斜面培養基的試管規格內徑為14-22mm，長度為18-23mm，試管的蓋為棉塞或硅橡膠塞，培養溫度為20-32℃，時間5-35天，待菌苔生長出后，加入5-12ml/支的無菌生理鹽水，將菌苔輕輕刮起，使菌苔表面的孢子盡可能地分散到鹽水中，用吸管將孢子液移至的三角瓶中；

(2)誘變處理：通過化學誘變劑、紫外線照射、衛星搭載和高能等離子輻射復合處理中的一種或兩種以上聯合處理孢子液，培養出圈卷產色鏈霉素菌變株；

(3)分離誘變株：取處理后的菌液0.05-0.5ml/皿加到事先鋪好的平板，培養基為高氏一號或葡萄糖-天門冬素培養基，用玻璃棒制成的三角刮鏟涂平板，進行培養，溫度為20-35℃，時間5-40天，培養出本發明的高產穩定的圈卷產色鏈霉菌變株。

6、如權利要求5所述的圈卷產色鏈霉菌變株的培養方法，其特征在于：該化學誘變劑處理為在制備的孢子液中，加化學誘變劑N-甲基-N’-硝基-亞硝基胍，終濃度為120微克-300微克，在溫度20-38℃條件下，上搖瓶機，轉速15-60轉/分，避光進行化學誘變處理，時間為20分鐘至90分鐘。

7、如權利要求5所述的圈卷產色鏈霉菌變株的培養方法，其特征在于：該紫外線誘變處理為，將制備好的孢子液加到內徑為4-10mm的雙碟中，加入量為3-15ml，在距離為250mm-600mm的紫外燈下，照射時間為30-200秒，處理前、后及處理過程中，均要求避免其他光線進行紫外線誘變處理。

8、如權利要求5所述的圈卷產色鏈霉菌變株的培養方法，其特征在于：該衛星搭載和高能等離子輻射復合處理為先將孢子液置于安培管及微生物培養箱內，在衛星搭載艙內隨衛星搭載，再置于高能等離子發生器內進行輻射誘變處理5-90秒鐘。

9、一種圈卷產色鏈霉菌變株的應用，其特征在于：圈卷產色鏈霉菌變株應用于工業化微生物發酶生產新多氧霉素及新多氧霉素衍生物的前體生產中。