[發明專利]從血清和血漿中制備DNA的改進方法

無效

• 申請號: 00104698.5
• 申請日: 2000-02-03
• 公開（公告）號: CN1270962A
• 公開（公告）日: 2000-10-25
• 發明（設計）人: L·博格梅耶;K·L·安吉
• 申請（專利權）人: 奧索臨床診斷有限公司
• 主分類號: C07H21/04
• 分類號: C07H21/04;C07H1/08;C12Q1/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 譚明勝

1.從血清或血漿中提取DNA的方法，所述方法包括：

(i)將清或血漿與堿接觸，制備堿化的血清或血漿；

(ii)將所述堿化的血清或血漿加熱至約100到110EC之間，保持約5到20分鐘，制備加熱的堿化血清或血漿；

(iii)離心所述加熱的堿化血清或血漿，制備含DNA的上清液；和

(iv)提取所述含DNA的上清液。

2.如權利要求1的方法，其中在所述加熱步驟(ii)之后，所述離心步驟(iii)之前，將所述加熱的堿化血清或血漿放冷或冷卻至約25EC。

3.如權利要求2的方法，其中所述堿為氫氧化鈉。

4.如權利要求2的方法，其中所述溫度約為105EC。

5.如權利要求2的方法，其中所述時間約為5分鐘。

6.如權利要求2的方法，其中所述離心條件為約16000xg離心約2分鐘。

7.如權利要求2的方法，其中所述堿化的血清或血漿含有濃度約為15-50mM范圍內的堿。

8.檢測血清或血漿中含DNA的微生物的方法，所述方法包括：

(i)將受試者的血清或血漿與堿接觸，制備堿化的血清或血漿；

(ii)將所述堿化的血清或血漿加熱至約100到110EC之間，保持約5到20分鐘，以制備加熱的堿化或血漿；

(iii)離心所述加熱的堿化血清或血漿，以制備含DNA的上清液；

(iv)提取所述含DNA的上清液；

(v)用識別所述含DNA微生物的DNA中的序列的寡核苷酸引物擴增所述上清液中的所述DNA，形成對所述含DNA微生物的特異性的擴增產物；和

(vi)檢測所述擴增產物，

其中所述擴增產物的檢測表明在所述血清或血漿中存在所述微生物。

9.如權利要求8的方法，其中在所述接觸步驟(ii)之后，所述離心步驟(iii)之前，將所述加熱的堿化血清或血漿放冷或冷卻至約25EC。

10.如權利要求8的方法，其中所述溫度約為105EC。

11.如權利要求8的方法，其中所述微生物是細菌。

12.如權利要求8的方法，其中所述微生物是病毒。

13.如權利要求12的方法，其中所述病毒是人巨細胞病毒。

14.如權利要求8的方法，其中所述堿化的血清或血漿含有濃度約為20mM的堿。