[其他]膠原酶制備工藝無效
| 申請號: | 85103913 | 申請日: | 1985-06-19 |
| 公開(公告)號: | CN85103913A | 公開(公告)日: | 1986-12-24 |
| 發明(設計)人: | 卞祖寧;于保貞;王若駒;張蓓蕾;許海寶;孫憶華 | 申請(專利權)人: | 國家醫藥管理局上海醫藥工業研究院 |
| 主分類號: | C12N9/54 | 分類號: | C12N9/54;// |
| 代理公司: | 上海市專利律師事務所 | 代理人: | 王巍,馮佩玉 |
| 地址: | 上海市北京西*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | 本發明屬于酶工程或生物工程的技術領域。膠原酶是一種在生理pH及溫度條件下水解天然膠原酶的水解蛋白酶,我們將組織梭菌Cl·histolyticum64008經改進的培養基、發酵液靜止發酵得到毒性低的膠原酶,將發酵液經過無菌過濾,硫酸銨沉淀、脫鹽、凍干獲得膠原酶粗品,再經DEAE柱層析及SephadexG-25脫鹽,凍干后可得精品,該膠原酶是細胞分離的重要工具酶,其油膏制劑用于治療清瘡脫痂,其注射用于治療椎脊盤突出癥 | ||
| 搜索關鍵詞: | 膠原酶 制備 工藝 | ||
【主權項】:
1、一種利用組織梭菌Cl,histolgticum64008經培養發酵后再經DEAE纖維素及分子篩分離提純膠原酶的工藝,本發明的特征在于將菌種經組份為酵母膏0.2-1%,酵母粉0.2-1%,明膠1-3%,肉胨2-6%的培養基在溫度為37-42℃,周期40-45小時靜止發酵后,無菌過濾,在10℃以下加硫酸銨沉淀膠原酶,使濃度達到45-55%(重量/體積),所獲沉淀溶于PH7-8Tris-Ca++緩沖液在低溫與氮氣加壓下經招濾膜脫鹽,冷凍干燥獲膠原酶粗品,然后經以PH5-6,HAC-NaAc緩沖液平衡之DEAE纖維素柱層析,下柱液再經PH6.0-7.5電導水平衡的SephadexG-25粒,得到溶液經冷凍干燥即為膠原酶精品。
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