[發明專利]血液組分的深低溫保藏和復蘇改進

有效

• 申請號: 99802743.X
• 申請日: 1999-12-06
• 公開（公告）號: CN1290124A
• 公開（公告）日: 2001-04-04
• 發明（設計）人: E·帕格斯
• 申請（專利權）人: 赫默內蒂克斯公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 盧新華,楊九昌

發明領域

本發明一般地涉及保存血液和血液組份，更具體地，本發明涉及一種在冷凍前向紅細胞里添加深低溫保藏液以及使用前將其從紅細胞中洗去的改進系統。

發明背景

人的血液主要包括三種特化細胞：紅細胞、白細胞和血小板。這些細胞懸浮在一種被稱為血漿的蛋白質及其他化學物質混合物水溶液中。在過去，輸血一直使用全血，但當前傾向于對特殊病人僅收集和輸送他所需要的那些血液組份。這種方法能保存有效的血液供應，在多數情況下對病人有利，因為病人不接觸不需要的血液組份。

血液組份一般從供血者采集的全血中獲得。一種一次性使用的由器具(例如輸液管和接頭)、采血針和一個或多個收集袋組成的血液采集裝置，用于從供血者采集全血。詳細地說，將采血針扎入供血者的手臂，血液在重力的作用下流入裝有抗凝劑的收集袋里。隨后，用血液處理器將全血分成一種或多種要求的組份。血液處理器包括旋轉的分離室，它使全血多次受到重力的作用，從而根據密度將各種血液組份分開。即密度大的組份如紅細胞(RBCs)聚集在分離室里的外周，而密度小的組份通過一個出口流出。當分離過程完成后，分離室里的RBCs被移去。血液組份也可以通過單采血液成分術(apheresis)獲得，來自供血者的全血直接提供給血液處理器進行分離和收集。對于這種方法，任何未收集的血液組份都可直接回輸給供血者。

收集的血液組份在回輸給供血者或輸給其他病人之前可以保存。例如，單個的血液組份如RBCs可以在4℃左右冷藏數天。還有其它方法冷凍RBCs來進一步延長它們的儲存時間。例如，根據RBCs的制備方法，RBCs能在-80℃或-160℃左右深低溫保藏數年。

具體地說，RBCs通常與甘油一起保存，甘油在冷凍之前穿過細胞膜。沒有甘油，RBCs在冷凍過程中不能存活。授予Valeti的名稱為用于儲存和處理血液的設備及方法的美國專利No.33,924中公開了一種保存和處理血液的方法和設備，在冷凍前使RBCs甘油化及輸血前從融化的RBCs洗去甘油。尤其是在盛RBCs的袋子里分三步加入甘油。首先，將RBCs袋放在搖床上，以每分鐘約180次的速度進行搖動，50ml的甘油溶液依靠重力加入袋中。將搖床關閉約5分鐘，使RBCs和甘油達到平衡。下一步，打開搖床，再向袋中加入約50ml的甘油溶液。再次關閉搖床使RBCs和甘油溶液平衡約兩分鐘。然后將袋子從搖床上取下，操作員一邊手工搖動袋子一邊再加入約400ml的甘油溶液。

將袋子放在一種袋子離心裝置上來濃縮甘油化的RBCs。結果袋子里含有濃縮的、甘油化的RBCs和上清甘油溶液。為了除去上清，將袋子置于血漿提取器里。然后將其封存于外包裝紙的袋子里，放在-80℃冰箱里保存。正如‘924專利里注釋的，整個處理過程必須在4小時內完成，獲得的甘油化的RBCs有約60％的血細胞比容。

因此，現有技術的甘油化處理過程是費時、費力的工作。而且需要技術熟練的操作人員以確保甘油溶液在適當的時間有適合的量。不適當的給予甘油滲透壓(osmolite)可能損傷RBCs。特別是，如果加入甘油的速度過快，RBCs將受到摩爾滲透壓濃度的休克，而導致細胞損傷。

現有技術的在輸血前洗滌融化的、冷凍保存的RBCs的方法很顯然也是費時、費力的工作。更具體地，如‘924專利所描述的，將冷凍的RBCs袋子放在熱水浴中20-25分鐘融化RBCs。應用一種儀器，如Haemonetics?Corp．的115型，包括搖床、離心裝置和洗滌滾筒。首先，50ml?12％氯化鈉溶液依靠重力流入袋里，通過搖床的搖動與融化的RBCs混合。關閉搖床兩分鐘使兩種溶液達到平衡。然后再次，打開搖床，向袋子里加入100ml的0.9％氯化鈉和0.2％葡萄糖溶液，搖動混合。然后關閉搖床約兩分鐘讓溶液平衡。再次打開搖床，向袋子里加入150ml氯化鈉/葡萄糖溶液。關閉搖床兩分鐘。對于甘油溶液，向融化的RBCs里加入每種體積的洗滌溶液也是一個必須謹慎處理的過程。特別是，洗滌溶液也是一種滲透壓(osmolite)，如果加入過快可能導致RBCs細胞膜的破裂。

離心袋子里的內容物以除去洗滌溶液和甘油，將得到的RBCs轉移到收集袋里。在輸液前，洗滌后的RBCs通過離心進行濃縮并除去上清。最終的RBCs的血細胞比容低于40％。