[發明專利]一種耐貯藏的微粒,特別是一種用于載體結合反應的載體及其生產方法

無效

• 申請號: 96199745.1
• 申請日: 1996-11-22
• 公開（公告）號: CN1207810A
• 公開（公告）日: 1999-02-10
• 發明（設計）人: D·普拉克斯納;E·格羅馬科維斯凱爾;C·艾爾哈德特
• 申請（專利權）人: 阿比翁參股及管理股份有限公司
• 主分類號: G01N33/546
• 分類號: G01N33/546
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 羅宏,溫宏艷

本發明的目的是一種耐貯藏的微粒，特別是一種用于載體結合反應、檢測和(或)分離方法的微粒載體，生產這種耐貯藏微粒的方法，及本發明的微粒的用途。

由固體核芯和多聚物組成的微粒載體已為人知，且已應用于多種目的。尤其是，這種微粒已用作免疫測定標志，用多聚物，如生物多聚物，將固體核與親和成分相結合。多種微粒物質已得到使用：特別是金屬微粒溶膠，如有色金屬微?；虼判晕⒘?；非金屬微粒，如硒、煤粉、SiO₂或陶瓷微粒；血球，甚至還有帶著另一種具有不同(結合)特性的多聚物的乳膠微粒。

因此，US?4,230,685描述了特異性粘合劑與磁性微粒結合的改進：按此，用丙烯酸酯聚合物(Acrylatpolymer)或多糖涂蓋在微粒上，用戊二醛將蛋白A結合在此涂層上。

US?4,452,773描述了磁性-葡聚糖微粒的生產。這類微粒的大小為100-700，尤其是300-400。有大量的微粒是膠態的，有鐵磁性，帶有葡聚糖的外殼。得到的微粒用高碘酸鹽氧化使之功能化。

EP-B-452,342是關于涂有多糖、具有膠體大小的超順磁微粒。這種微粒可與附加的基團相結合。將微粒混合物分選成具有一致磁化水平的一定大小的組分，該組分展現了在磁場中阻滯性(Retardierung)的均一。敘述了按照大小來分離的可能性。優選用多糖或蛋白質涂蓋。多糖用高碘酸鹽氧化而功能化。此外，可能用溴化氰進行功能化。蛋白外殼與微粒分子的結合可能由側鏈氨基或硫氫基完成。

DE-A-4037,724是關于使用直接或間接的標志物進行免疫測定的設計。優選采用直接標志物因為它們不需要另外的步驟來使測試結果可視化。直接標志物的例子如金屬溶膠，染料溶膠，乳膠微粒、顏色指示劑、脂質體上的色料及非金屬溶膠如碳溶膠。DE-A-4037724的另一方面是關于一種免疫化學活性標志物。煤粉顆粒與一個配基或配基共軛物吸附結合。檢測的靈敏度，以人絨毛膜促性腺激素hCG為例為25mIU/ml(IU＝國際單位)。

EP-A-0,410,893描述一種在生物液體中測定和識別針對特異抗原的抗體的方法。列出的不溶性載體微粒包括：細胞、凝膠微粒、微膠囊、有機多聚物、無機細微粒、或用牛血清白蛋白或膽固醇精細分散的金屬或金屬化合物的膠體微粒。

EP-A-0,032,270描述用一種或幾種標志化合物定量地或定性地測定一種免疫成分的方法：將這些分成直接地或間接地與在親水染料或色素的水性分散體系中的微粒或者涂蓋有這類染料或色素的多聚物核相結合。

EP-0,321,008是關于藉特異結合蛋白與樣品中相應的可結合物質間的反應，測定一種或幾種成分的方法。這種成分與至少一個的標志成分間的相互反應活性，是靠直接或間接地耦聯或吸附標志溶膠微粒而得到的。優選的溶膠微粒為磷、碳和/或硅。將這種微粒表面用含極性基團的大分子包裹可以防止凝集和聚集，這種大分子可以是蛋白、聚乙二醇、多聚糖、聚乙烯醇及其它。適宜的保護蛋白有抗原、抗體和抗-抗體。免疫化學惰性物質如白蛋白、聚乙二醇或其它極性大分子也可使用。檢測的靈敏度，以免疫球蛋白G為例，為1.5ng絕對量。

EP-0,298,368是關于使用含膠體鐵金屬的微粒進行診斷性免疫測定的一種方法。這種微粒帶有一種結合物能特異地識別待測物質，檢測hCG的靈敏度在mIU/ml范圍。

EP-A-0,280,560公開了共價結合于核/外殼多聚物微粒的鏈球菌A抗原抗體。微粒外殼是由聚(mp-氯甲基苯乙烯)構成的，核芯則是聚(苯乙烯-CO-2-acetoacetoxidethyl??methylacrylate)構成的，核內含有油紅EGN，以得到一種凝聚試劑。

US?4,452,886描述賴氨酸與戊二醛及剛果紅聚合成顏色微粒。對hCG的測試靈敏度在1000?IU/ml的范圍。

Collins?WP在他的“任選的免疫測定”一書(John??Wiley?&?Sons，Chichester，紐約，等)的“分散染料免疫測定(DIA)”一章的48-49頁中描述了微粒標志物的優點，并指出基本參數的意義，如微粒大小，分布與形式，有機溶劑中的溶解度，膠體穩定性及結合容量，譬如，對抗體的結合。他提及的測試的靈敏度在mIU/ml范圍。結合物如以凍干狀態貯存在-20℃或4℃，其穩定性至少為15個月，水性結合物應在制備后6天內用掉。

JP-A-0686,777是關于用膠囊包起來的調色劑及其生產。