[發(fā)明專(zhuān)利]對(duì)血球比率低敏感性的血糖試紙

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 96119240.2
• 申請(qǐng)日: 1996-10-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1100267C
• 公開(kāi)（公告）日: 2003-01-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: Ｙ·Ｓ·余
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 生命掃描有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/66
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/66
• 代理公司: 中國(guó)專(zhuān)利代理(香港)有限公司
• 代理人: 譚明勝

本發(fā)明涉及一種測(cè)量全血樣品中葡萄糖濃度的干相試紙；更確切地說(shuō)，是一種對(duì)血樣的血球比率相對(duì)不敏感的試紙。

目前在臨床實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)生診室、醫(yī)院和家庭中廣泛使用含有以酶為主的組合物的干相試紙測(cè)定生物液體樣品的葡萄糖濃度。實(shí)際上，這種試紙已成為全球幾百萬(wàn)糖尿病患者中多數(shù)人的每日必需品。因?yàn)樘悄虿?huì)引起血液化學(xué)中危險(xiǎn)的異常變化，所以它會(huì)導(dǎo)致視力下降、腎衰竭以及其他嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)后果。為了把這些后果的危險(xiǎn)性降到最低，多數(shù)糖尿病患者必須自已定期進(jìn)行測(cè)試，然后再相應(yīng)地通過(guò)例如控制飲食和/或注射胰島素來(lái)調(diào)節(jié)自身的葡萄糖濃度。有些患者必須一天四次或多次經(jīng)常性地測(cè)試其血糖濃度。

對(duì)那些為調(diào)整糖的攝取和/或胰島素注射液的使用而必須控制飲食的糖尿病患者，以及在這方面必須通過(guò)頻繁地檢測(cè)血糖濃度來(lái)作為指導(dǎo)的那些糖尿病患者來(lái)說(shuō)需要一種快速、廉價(jià)和精確的葡萄糖檢測(cè)試紙。

含有指示劑的試紙是公知的，它能根據(jù)點(diǎn)到試紙上血樣的葡萄糖濃度的不同而轉(zhuǎn)變?yōu)椴煌顪\的顏色。這類(lèi)試紙中的一些包括一種能夠?qū)⑵咸烟茄趸癁槠咸撬醿?nèi)酯和過(guò)氧化氫的酶，如葡糖氧化酶。它們也含有一種可氧化的染料和一種具有過(guò)氧化活性的物質(zhì)，其中的過(guò)氧化活性物質(zhì)能在過(guò)氧化氫存在下有選擇性地催化可氧化染料的氧化(參見(jiàn)，如1990年6月19日公布的Phillips等的美國(guó)專(zhuān)利4,935,346)。

無(wú)論是在家中、醫(yī)生診室中、臨床或醫(yī)院中進(jìn)行葡萄糖測(cè)定，它的精確性和可重視性都十分重要，對(duì)顏色顯示的試紙來(lái)說(shuō)，理想地是顏色變化顯著并且對(duì)血液中葡萄糖之外的其他化合物的變化不敏感。對(duì)可讀試紙來(lái)說(shuō)，視力可能已受到損害的糖尿病患者有一種能夠根據(jù)葡萄糖濃度的不同顯示出顯著的顏色變化的檢測(cè)試劑是更為重要的。在給定波長(zhǎng)處具有吸收和/或反射的變化的顏色改變對(duì)讀數(shù)試紙的精確性也是很重要的。

各種干擾因素的存在會(huì)影響試紙的性能，有些人已經(jīng)認(rèn)識(shí)到了降低或消除臨床化學(xué)中的這些干擾因素影響的必要。例如1994年1月19公布的Arter等人的歐州專(zhuān)利申請(qǐng)93111290.8公開(kāi)了一種測(cè)定含水液體中分析物的分析成分。該成分包括一種能與液體中存在的自由巰基鍵合的試劑。Arter等人的主要目的是測(cè)定被分析物如乙酰氨基苯、水揚(yáng)酸酯、肌酸酐，膽固醇，HDL膽固醇，甘油酸酯，葡萄糖和尿酸。他們使用產(chǎn)生過(guò)氧化氫的酶，并通過(guò)過(guò)氧化物酶偶氧化還原化學(xué)對(duì)其測(cè)定?？赡艽嬖谟谝后w中的干擾巰基(如存在于服用某些藥的人的血清中的N-乙酰巰基丙氨酸)即使在被分析物不存在的情況下也可能誘發(fā)氧化/還原反應(yīng)。Arter等人利用加入能與巰基反應(yīng)并鍵合的試劑的方法來(lái)解決干擾自由巰基的問(wèn)題。適宜的試劑包括馬來(lái)酰亞胺，N-乙基馬來(lái)酰亞胺、碘乙酰胺、硝酸銀和氯化金。

1993年2月9日公布的Ismail等人的美國(guó)專(zhuān)利5185247公開(kāi)了一種以酶為主的試紙，它是通過(guò)添加了各種成分來(lái)穩(wěn)定的。這些成分包括具有熱穩(wěn)定性試劑中的咪唑，但是它僅對(duì)浸漬了“抗壞血酸干擾成分”的試紙有效，其中的“抗壞血酸干擾成分”包括氧化汞和肌氨酸。因?yàn)橹亟饘傺趸镉卸?，一般最好不加入試劑中?/p>

1993年12月15日公布的Matzinger等人的歐州專(zhuān)利申請(qǐng)93303643、6公開(kāi)了一種測(cè)定全血中葡萄糖濃度的試紙。該試紙有一個(gè)測(cè)試墊板，它含有通過(guò)改變顏色來(lái)指示葡萄糖濃度的試劑系統(tǒng)。測(cè)試墊板是由各向異性膜構(gòu)成的，靠近主表面有相對(duì)較大的孔，靠近反面的孔較小。在墊板的大孔面粘附有一個(gè)多孔轉(zhuǎn)運(yùn)基質(zhì)。將全血樣品點(diǎn)到轉(zhuǎn)運(yùn)基質(zhì)上，基質(zhì)將樣品中可檢測(cè)部分轉(zhuǎn)運(yùn)到墊板的大孔面。然后樣品中的葡萄糖向反面移動(dòng)，并與試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化，變色可從墊板的小孔面看到，并指示出樣品中的葡萄糖濃度。

Kiser等人的美國(guó)專(zhuān)利5306623公開(kāi)了一種測(cè)血糖試紙，它包括一個(gè)從全血中分離紅細(xì)胞的分離基質(zhì)。檢測(cè)試劑與被分離后的成分反應(yīng)引起變色，從而指示血液中的葡萄糖濃度。公開(kāi)的分離層包涵物組分是聚丙烯聚合物(CarbopolR)，在這些“分離成分”(也稱(chēng)作“血球比率調(diào)節(jié)劑”，沒(méi)有進(jìn)一步解釋)一般存在于單獨(dú)的分離層中同時(shí)，Kiser等人還公開(kāi)了一個(gè)單層基質(zhì)，它包括既含有可產(chǎn)生信號(hào)的成分又含有分離血液成分的試劑。無(wú)論是任何情況下，確切地說(shuō)分離成分的用量范圍是7％到35％w/v。實(shí)際上在這些試劑中Cavbopol不會(huì)以這種濃度范圍使用。

眾所周知測(cè)血糖時(shí)干擾因素會(huì)影響試紙的顏色變化。例如，測(cè)定葡萄糖中顏色變化的強(qiáng)弱一般好象與血液中紅細(xì)胞的濃度(血球比率)有關(guān)。