[發(fā)明專利]一種檢測(cè)柯薩奇B組病毒抗體的合成肽試劑

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 96116251.1
• 申請(qǐng)日: 1996-02-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1075512C
• 公開(kāi)（公告）日: 2001-11-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊英珍;楊昌生
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海市心血管病研究所
• 主分類號(hào): C07K7/08
• 分類號(hào): C07K7/08;G01N33/569
• 代理公司: 上海醫(yī)科大學(xué)專利事務(wù)所
• 代理人: 吳桂琴

本發(fā)明屬病毒抗體檢測(cè)領(lǐng)域。

合成肽可以模擬完整的蛋白質(zhì)，代替后者檢測(cè)抗體[Leinikki,P.et?al.Adv?Virus?Res.43(1):149-186；1993.]。應(yīng)用合成肽檢測(cè)抗體主要是使用固相免疫法(如ELISA，放射免疫法)。合成肽能夠提供化學(xué)組成確定的、均勻一致的抗原用于檢測(cè)抗體，特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。由于合成肽包被于固相上的密度很高，能明顯增加檢測(cè)的敏感性。此外，合成肽還具有制備簡(jiǎn)單，穩(wěn)定、易保存，價(jià)格性能比合理等優(yōu)點(diǎn)。因此應(yīng)用合成肽檢測(cè)抗體的研究受到越來(lái)越多的重視。

柯薩奇B組病毒(CVB)有6個(gè)血清型，CVB感染可引起心肌炎，心包炎，流行性胸痛(Bornholm病)，無(wú)菌性腦炎，無(wú)菌性腦膜炎，肌松馳性癱瘓癥，熱性皮疹，夏季感冒，中耳炎，肺炎，胰腺炎，胃腸炎，以及肝炎等多種疾病[向近敏，醫(yī)學(xué)病毒學(xué)，339-342，上海科學(xué)技術(shù)出版社，1986]。檢測(cè)CVB抗體的常用方法包括用中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)從血清或腦脊液中檢測(cè)特異性病毒抗體。近年來(lái)還發(fā)展了應(yīng)用免疫酶法(EIA)或固相放射免疫法(SPRIA)來(lái)檢測(cè)病毒抗體[Bendinelli,M.Coxsackieviruses--A?general?update.PlenumPress.203-219；1988.]。然而，這些方法都不盡如人意，中和試驗(yàn)雖然敏感性和特異性均好，但是需要大量的組織培養(yǎng)工作，通常要求檢測(cè)雙份血清，耗時(shí)費(fèi)力，操作繁瑣。

由于在血清中檢測(cè)到CVBIgM抗體通常表明患者存在急性或持續(xù)CVB感染[Bendinelli,M.Coxsackieviruses-A?general?update.PlenumPress.203-219；1988.]，用固相免疫法檢測(cè)血清中CVBIgM抗體具有高度敏感性和特異性，且可在一天內(nèi)完成。因此，在CVB感染的血清學(xué)檢測(cè)中，應(yīng)用CVB病毒顆粒的固相免疫法得到廣泛的研究和重視。并發(fā)展了間接固相免疫法(ISPIA,indirect?solid-phaseimmunoassay)，和捕捉IgM抗體免疫法(IgM?antibody-captureimmunoassay,MACIA)兩種主要檢測(cè)CVBIgM抗體的方法。但是，固相免疫法仍需使用病毒抗原，需要培養(yǎng)病毒，而且CVB和其它腸道病毒之間存在廣泛的交叉反應(yīng)，導(dǎo)致假陽(yáng)性。因此，尋找CVB的共同抗原表位作為廣譜的檢測(cè)CVB抗體的合成肽試劑，建立快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)CVBIgM抗體的免疫酶法，具有重要的臨床價(jià)值。

本發(fā)明的目的是提供一種用合成肽代替CVB病毒檢測(cè)CVB抗體的檢測(cè)試劑，建立快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)CVBIgM抗體的間接ELISA法，及捕捉IgM抗體ELISA法(MAC-ELISA)。

本發(fā)明的技術(shù)方案是使用含有CVB共同優(yōu)勢(shì)抗原表位的合成肽(VP1-1肽和VP3-1肽)作為抗原，代替CVB病毒檢測(cè)CVBIgM抗體