[發明專利]脫氨基神經氨酸酶及其制備方法

無效

• 申請號: 95194792.3
• 申請日: 1995-06-19
• 公開（公告）號: CN1073156C
• 公開（公告）日: 2001-10-17
• 發明（設計）人: 井上康男;井上貞子;北島健
• 申請（專利權）人: 生化學工業株式會社
• 主分類號: C12N9/24
• 分類號: C12N9/24
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 羅宏,姜建成

1．一種具有下列酶學性質的脫氨基神經氨酸酶：

(1)作用：

該脫氨基神經氨酸酶作用于含有脫氨基神經氨酸的復合多糖或糖類，并且水解由脫氨基神經氨酸形成的酮苷鍵，以生成游離的脫氨基神經氨酸和不含有脫氨基神經氨酸的復合多糖或糖類，或者部分去除脫氨基神經氨酸的復合多糖或糖類；

(2)底物特異性：

該脫氨基神經氨酸酶作用于含有脫氨基神經氨酸的復合多糖或糖類，但不作用于含有N-乙酰神經氨酸或N-乙二醇酰神經氨酸復合多糖或糖類中由N-乙酰神經氨酸或N-乙二醇酰神經氨酸形成的酮苷鍵；

其中所述酶具有以下的理化性質：

(ⅰ)最適反應pH；

該脫氨基神經氨酸酶在pH6附近具有最適的反應pH值；

(ⅱ)穩定的pH范圍

在25℃下，該脫氨基神經氨酸酶在pH4至9范圍內穩定；

(ⅲ)最適反應溫度：

在25℃左右，該脫氨基神經氨酸酶具有最適的反應溫度；

(ⅳ)熱穩定性：

在25℃下，該脫氨基神經氨酸酶至少48小時不會失活；

(ⅴ)抑制和穩定化作用：

該脫氨基神經氨酸酶被游離的脫氨基神經氨酸抑制，并且存在蛋白，如牛血清蛋白時，該脫氨基神經氨酸酶可被穩定；

(ⅵ)分子量：

該脫氨基神經氨酸酶基于凝膠過濾法測得的分子量大約為40,000至50,000。

2．權利要求1的脫氨基神經氨酸酶，該酶由鞘氨醇桿菌mOL12-4s菌株產生。

3．一種用于生產脫氨基神經氨酸酶的方法，包括培養屬于鞘氨醇桿菌屬并具有生產脫氨基神經氨酸酶能力的細菌，以及從所得培養物中收集該酶的步驟，該脫氨基神經氨酸酶由權利要求1所定義。

4．保藏號為FERM?BP-5116的鞘氨醇桿菌mOL?12-4s菌株。

5．一種用于生產含有脫氨基神經氨酸復合多糖或糖類的方法，包括將權利要求1所定義的脫氨基神經氨酸酶與脫氨基神經氨酸、復合多糖和/或糖類接觸。