[發(fā)明專利]DNA熱變性測量儀(meltometer)及其使用方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 95193250.0
• 申請日: 1995-03-24
• 公開（公告）號: CN1153536A
• 公開（公告）日: 1997-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 亞歷克·米亞恩
• 申請（專利權(quán)）人: 蓋默拉生物科學(xué)公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;B01L7/00
• 代理公司: 柳沈知識產(chǎn)權(quán)律師事務(wù)所
• 代理人: 巫肖南

1、一種核酸分析裝置，它包含以下聯(lián)用的部分：

熱調(diào)節(jié)室，其中可限定溫度；

加熱和冷卻元件，它與熱調(diào)節(jié)室保持熱接觸以控制熱調(diào)節(jié)室中的溫度；

檢測元件，用于在約為每種欲分析的核酸的Tm溫度下檢測熱變性的雙鏈DNA，從而對核酸進(jìn)行大小測定、定量、探測或測序。

2、一種方法，通過檢測一雙鏈DNA片段的熱變性來檢測多種雙鏈DNA片段的所述雙鏈DNA片段，該方法包括：

(a)在低于所述DNA片段熱變性的溫度之下，將多種雙鏈DNA片段放在權(quán)利要求1所述裝置的熱調(diào)節(jié)室中的溶液中；

(b)將熱調(diào)節(jié)室中的溫度線性和精密地升高到至少為所述DNA片段熱變性溫度；和????

(c)在該DNA片段的熱變性溫度下檢測熱變性的DNA片段。

3、權(quán)利要求1的裝置，其中檢測元件是量熱器。

4、權(quán)利要求1的裝置，其中檢測元件是熒光檢測器。

5、權(quán)利要求1的裝置，其中檢測元件是紫外分光光度計。

6、權(quán)利要求2的方法，其中DNA片段的一條鏈被可檢測地標(biāo)記。

7、權(quán)利要求6的方法，其中可檢測到的標(biāo)記物是熒光標(biāo)記物。

8、權(quán)利要求2的方法，其中每種DNA片段的一條鏈被束縛分子標(biāo)記。

9、權(quán)利要求8的方法，其中束縛分子是生物素或鐵蛋白。

10、權(quán)利要求1的裝置，其中熱調(diào)節(jié)室任選包含阻尼被束縛分子標(biāo)記的DNA片段的元件。

11、權(quán)利要求10的裝置，其中雙鏈DNA的阻尼元件是Teflon^R濾膜。

12、權(quán)利要求2的方法，其中每種DNA片段的一條鏈被生物素標(biāo)記并吸附到經(jīng)鏈霉抗生物素蛋白包覆的小珠上。

13、權(quán)利要求10的裝置，其中雙鏈DNA的阻尼元件是外部施用的磁場。

14、權(quán)利要求2的方法，其中多種DNA片段的每一種的一條鏈被鐵蛋白標(biāo)記。

15、權(quán)利要求1的裝置，其中熱調(diào)節(jié)室任選包含第一開口和第二開口，其中每個開口與泵元件連接以使緩沖溶液流經(jīng)熱調(diào)節(jié)室。

16、權(quán)利要求2的方法，其中含有多種DNA片段的溶液任選包含等穩(wěn)定化合物。

17、測定DNA片段大小的方法，此方法包括以下步驟：

(a)在低于DNA片段熱變性溫度的溫度下，將含有DNA片段的溶液放入權(quán)利要求1的裝置的熱調(diào)節(jié)室中；

(b)將熱調(diào)節(jié)室中的溫度逐漸升高到至少為DNA片段的熱變性溫度；和

(c)檢測DNA片段的熱變性。

18、權(quán)利要求17的方法，其中DNA片段的一條鏈被可檢測地標(biāo)記。

19、權(quán)利要求18的方法，其中可檢測到的標(biāo)記物是熒光標(biāo)記物。

20、權(quán)利要求17的方法，其中DNA片段的一條鏈被束縛分子標(biāo)記。

21、權(quán)利要求20的方法，其中束縛分子是生物素或鐵蛋白。

22、權(quán)利要求17的方法，其中含有多種DNA片段的溶液任選包含等穩(wěn)定化合物。

23、權(quán)利要求17的方法，其中多種DNA片段含有一套已知大小的標(biāo)準(zhǔn)化的可檢測到的標(biāo)記DNA片段。