[發明專利]從青脆枝中提取的生物堿及其應用和含該堿的組合物

無效

• 申請號: 94114908.0
• 申請日: 1994-07-30
• 公開（公告）號: CN1052233C
• 公開（公告）日: 2000-05-10
• 發明（設計）人: Ｅ·博馬德里;Ｇ·馬迪奇;Ｌ·韋洛塔
• 申請（專利權）人: 因迪納有限公司
• 主分類號: C07D471/14
• 分類號: C07D471/14;C07G5/00;A61K31/47;//C07D471/14;22100;22100;20900
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 唐偉杰

本發明涉及從青脆枝(MAPPIA?FOETIDA)中提取的新型生物堿及其在治療上的應用以及含該生物堿的組合物。

本發明的生物堿具有以下結構式(I)：

氟艾替丁(foetidine)1：R＝H氟艾替丁2：R＝OCH₃。

通過用酸或堿，或用水解酶處理，氟艾替丁1和2可以分別定量地釋出：在腫瘤學領域和治療一些病毒疾病中是已知的生物堿—喜樹堿或其衍生物，一種已在藥理學上和臨床上廣泛試驗的分子，或9-甲氧基喜樹堿，其用于上述相同的癥狀。

式(II)的喜樹堿，

與其它的化合物一起首次從喜樹(Camptoteca?acuminata)(珙桐科)和其中為青脆枝(Olinaceae)的其它的植物中分離出來；雖然對后者已研究了很長的時間，可是進一步的化學篩選卻出乎意料地發現了這些新型的生物堿，甚至在加工該種植物的粗提取物時，也可以得到喜樹堿。

在產生喜樹堿的化合物中，特別重要的是氟艾替丁1，這是由于它在植物中的含量相當豐富。通過光譜分析和化學降解，對其結構式的闡明可以得到一種化合物的鑒定結果，其特征在于具有以香豆酸雙酯化的亞精胺單元，該單元依次被開鏈的喜樹堿單元酯化(參見式(I))。該化合物含于植物的各個部分，但尤以種子和根莖中為多，其含量為0.1-0.5％。與喜樹堿相比，它的優點是在微酸性pH下易溶于水；相反，喜樹堿在水中甚至在生物學上適用的所有載體中均完全不溶解，因此，從半合成的角度進行了充分的研究，以期消除這一缺陷。

氟艾替丁1是用低分子量的脂族醇或酮(單一的或在室溫下與水的混合物)萃取植物的不同部分而得到的；將萃取液在低溫和真空下濃縮，優選低于25℃；除去有機相，并用氯化的溶劑萃取濃縮水溶液，以提取含量極低的堿性生物堿，其中含有喜樹堿、9—甲氧基喜樹堿和mappicines；其后，用正丁醇或水不溶混的醇類萃取水相，隨后，將其在低溫和真空下濃縮至干。由丁醇萃取而得的殘渣，在硅膠或類似的吸附劑上純化，用作氯化溶劑的洗脫劑混合物，優選二氯甲烷，和脂族醇類，優選甲醇或乙醇。優選采用4∶1至1∶1的混合物。將本發明含有生物堿的部分合并、濃縮至干，殘渣采用制備性HPLC，使用例如，LiClichrotrep?RP8柱進一步純化，并以甲醇/水之比從1∶1開始直到純甲醇的甲醇/水洗脫梯度洗脫。含生物堿的部分在低溫和真空下濃縮，并將濃縮的水溶液冷凍干燥。通過結晶而制得純的生物堿。

將所得的化合物進行對人體腫瘤細胞系(卵巢、乳房、結腸、肺、對其它抗癌劑和類似的藥劑是否有抗性)以及對某些病毒菌株的生物評價。事實上，已經知道喜樹堿或它的一些較好的衍生物具有與抑制DNA拓撲異構酶I和II有關的細胞毒活性。

細胞毒性，例如對結腸癌細胞系約為25nM。氟艾替丁1的抗病毒活性，即使涉及菌株的不同耐藥性，也可在1-100ng/ml的濃度下產生作用。氟艾替丁2在9-位上的甲氧基與氟艾替丁1的不同，但其作用類似。胞疹、細胞巨噬病毒和HIV病毒被證明對本發明的生物堿敏感。

本發明的化合物可以摻入各種藥品的組合物中，但最重要的是在與血液相容的pH下，以水溶液的形式，很容易通過腸道外引入機體，而不致產生例如沉淀或不相容的問題。在該組合物中，所有傳統的藥用賦形劑均可采用。這些新型生物堿的劑量可為每次劑量和療程為0.5-200mg。約50mg/m²的劑量被證明具有初步的療效。

下列實施例將對本發明作詳細說明，但對本發明的范圍絕無限制。實施例1??從青脆枝的種子中制備氟艾替丁1