[發明專利]通過懸浮培養再生棉花的方法

無效

• 申請號: 92110276.3
• 申請日: 1988-11-18
• 公開（公告）號: CN1032111C
• 公開（公告）日: 1996-06-26
• 發明（設計）人: 瑟福麥爾·斯瑞尼瓦薩·蘭安;大衛·莫里斯·安德森;卡恩尼阿·雷亞塞卡蘭;瓊·威廉·格魯拉;理查德·李·延奧斯基;理查德·洛恩·赫茲佩思
• 申請（專利權）人: 泛多金公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 李瑛

1.一種通過懸浮培養再生棉花的方法，其中

a)通過組織培養在含有葡萄糖的第一固體愈傷組織生長培養基中培養棉花外植體使愈傷組織生長足夠時間，以便從可形成愈傷組織的外植體中分泌酚而形成胚發生愈傷組織；

b)酚的分泌結束后將愈傷組織轉移至含有蔗糖作為碳源的第二固體愈傷組織生長培養基中并在第二固體生長培養基上將愈傷組織培養足夠時間，使胚發生愈傷組織發育以產生至少一個胚；

c)將在含有蔗糖的第二固體愈傷組織生長培養基中形成的胚發生愈傷組織分成幾塊，且懸浮于含有蔗糖的液體愈傷組織生長培養基中并在所說的懸浮培養物中從所述愈傷組織發育成大小至少為600微米的胚發生塊；

d)從液體愈傷組織生長培養基中回收大于600微米的胚發生塊；

e)在植物萌發培養基中將大于600微米的胚發生塊培養足夠時間，以從這些胚發生塊形成小植物。

2.權利要求1所述的方法，其中將小于600微米的胚發生塊再懸浮于新鮮第二液體生長培養基中，以使胚發生塊進一步生長。

3.權利要求1或2所述的方法，其中從懸浮液中移出大于800微米的胚發生塊，以形成小植物。

4.權利要求1或2所述的方法，其中生長開始時的懸浮培養物為每8ml液體胚生長培養基中含有750-1000mg愈傷組織部分。

5.權利要求1或2所述的方法，其中外植體選自下胚軸、子葉及其混合物，以及未成熟的合子胚。

6.權利要求1或2所述的方法，其中至少胚發生愈傷組織通過在25-35℃的溫度下，16小時光照和8小時無光的光照—無光交替條件下培養而發育的。

7.權利要求6所述的方法，其中光照期間的光強度為2,000—4,000勒。

8.權利要求6所述的方法，其中光照期間的光強度為3,000—4,000勒。

9.權利要求1或2所述的方法，其中在酚分泌結束之前，至少每隔10天更換一次含有葡萄糖的固體愈傷組織生長培養基。

10.權利要求1或2所述的方法，其中第一生長培養基是Murashige-Skoog氏培養基。

11.權利要求10所述的方法，其中第一生長培養基含有萘乙酸。

12.權利要求1或2所述的方法，其中第二固體愈傷組織生長培養基為Murashige-Skoog氏培養基。

13.權利要求1或2所述的方法，其中第二固體愈傷組織生長培養基為含有萘乙酸的Murashige-Skoog氏培養基。

14.權利要求13所述的方法，其中第二固體愈傷組織生長培養基含有大約1至5mg/l萘乙酸和0至1mg/l細胞分裂素。

15.權利要求1或2所述的方法，其中胚萌發培養基含有銨源。

16.權利要求14所述的方法，其中植物萌發培養基是富含氮源的Beasley-Ting氏培養基。

17.權利要求16所述的方法，其中胚萌發培養基為含有至多500mg/l的酪蛋白水解物及至多1200mg/l硝酸銨的Beasley-Ting氏培養基。