[發明專利]全血樣中纖維蛋白原的定量

無效

• 申請號: 91103571.0
• 申請日: 1991-05-31
• 公開（公告）號: CN1031771C
• 公開（公告）日: 1996-05-08
• 發明（設計）人: 斯蒂芬·C·瓦得勞;羅伯特·A·列文;阿蘭·H·哈特
• 申請（專利權）人: 斯蒂芬·C·瓦得勞;羅伯特·A·列文;布斯托恩·狄科因遜公司
• 主分類號: G01N33/49
• 分類號: G01N33/49
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 唐偉杰

本發明涉及全血樣中血纖維蛋白原含量的定量方法。具體地，本發明涉及到快速、準確直觀地測定離心血樣中纖維蛋白原含量的方法。

纖維蛋白原是主要的血漿蛋白，是正常血凝所必需的，血液中纖維蛋白原的含量與血液形成血塊的能力成正比。在血塊形成過程中，纖維蛋白原轉化成纖維蛋白，因此纖維蛋白原的缺乏將導致纖維蛋白形成不足和凝血不足。

血漿中纖維蛋白原水平的不足可能是由纖維蛋白原生成減少所引起的，如肝衰竭，或先天血纖維蛋白原過少。彌漫性血管內血凝(一種病理狀態)也使用于形成血塊的纖維蛋白原的消耗量高于正常值。顯然，纖維蛋白原不足可引起出血過多。

血中過量的纖維蛋白原也是不正常的，通常與炎癥狀態有關。血中高含量的纖維蛋白原容易發生血凝固性過高，這也是不受歡迎的。還發現懷孕婦女纖維蛋白原水平顯著升高。

據測定發現血中纖維蛋白原濃度增高是心血管病的一個危險的因素。

由上可見，血中纖維蛋白原水平的檢測是確定患者健康情況的有效方法，也可用做預報身體條件異常的工具。因此血纖維蛋白原含量分析是用于正?；颊邫z查或體格檢查早期警告的有價值的方法。

有幾種定量分析血漿纖維蛋白原的適用方法。目前所用的方法需要血漿與血細胞完全分離，并且大部分需要將血漿中的纖維蛋白原轉化為纖維蛋白。隨后。纖維蛋白經重量分析，濁度分析或化學分析進行定量。血漿中纖維蛋白原的免疫及化學/物理沉淀定量分析也包括在前述方法中。

Millar于1971年發表的方法，涉及到測定離心的血漿部分中加熱沉淀的纖維蛋白原譜帶的方法。纖維蛋白原的加熱沉淀在Millar及其它人的文章中有述，包括Fredericq在1877年；Schulz在1955年；Goodwin在1965年及Low等人在1967年。血漿與血樣中其它成份分離后，將血漿吸入到微量血細胞比容管，在56℃水浴中加熱3分鐘，隨后將加熱的樣品離心，在血漿中形成纖維蛋白沉淀帶。纖維蛋白帶的長度除以原血漿柱的長度可得到樣品中纖維蛋白原的含量。本方法將聚集沉淀的纖維蛋白的體積百分比直接轉化為纖維蛋白原濃度，并假設以mg/100ml血漿表示的血漿中纖維蛋白體積濃度等于百分之一(1.0％)的血樣中纖維蛋白原濃度，以mg/100ml血表示。應用前述方法，加熱并離心后，上清血漿中不含有纖維蛋白原，經測定可知，加熱過程中，其它正常的血漿蛋白不被沉淀。

除了Low等人的方法(前面已有介紹并在以后詳述)外，前述的定量測定血樣中纖維蛋白原的方法相對較復雜且費時，因為需要將全血樣預處理，使血漿與其它血液成份分離，隨后從其它血液成份中分離出。分離后的血漿轉移到其它容器，進一步處理并分析。測定纖維蛋白原的全部實驗過程的復雜性表明，該分析必須在醫學實驗室中進行，而不能在醫生辦公室方便地進行。

Low等人1967年的方法，則不需進行從血漿中分離形成的血液成分的預處理步驟，不需從淡黃色外層中分離沉淀的纖維蛋白原，其位于聚集的紅血細胞上層，Low等人的方法如Millar的方法所述，包括將預先被離心的含有血樣的微量血細胞比容管于56℃加熱3分鐘，該管以12,000G的轉速再離心3分鐘，熱沉淀的纖維蛋白原直接落于相似顏色淡黃色外層的上層。

本發明涉及到的定量分析血樣中纖維蛋白原含量的方法為，使用血樣管和測定白血細胞計數的先有技術中所披露的浮標經簡單離心過程進行。所用的裝置和一般細胞計數測定方法在下列美國專利中有介紹：美國專利：4,027,660(1977年6月7日批準)；4,077,396(1978年3月7日比準)；4,082,085(1978年4月4日批準)和4,137,755(1979年2月6日批準)。將其全部收載于此。作為參考還批準了這些發明者的其它一些專利，他們使用試管和浮標裝置進行了其它的血液分析和其它樣品的分析。