[發明專利]類風濕性關節炎診斷劑

無效

• 申請號: 90103723.0
• 申請日: 1990-05-19
• 公開（公告）號: CN1036156C
• 公開（公告）日: 1997-10-15
• 發明（設計）人: 山田雄二;楢木徹;小出醇;水落次男
• 申請（專利權）人: 衛材株式會社
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/566;G01N33/66
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 唐偉杰

本發明涉及含蛋白質A或G和一種帶標記的植物血凝素作為主要成分的類風濕性關節炎診斷劑，其用于醫藥領域診斷類風濕性關節炎。

大家知道，稱作“類風濕性因子”的自身抗體存在于類風濕性關節炎患者(本說明書中簡寫為PA患者)血清中并能識別存在于人免疫球蛋白G(本說明書中簡寫為“IgG”)Fc區中的抗原(參考文獻1)。近來已對R?A患者血清IgG的FC區的碳水化合物鏈作了詳細分析。本發明中的一些發明人以前發現RA患者血清IgG的FC區的碳水化合物鏈的半乳糖含量比健康人要低許多(參考文獻2)。也即是說，業已發現健康人的血清IgG的FC區的碳水化合物鏈是由各種具有微觀不均一性而其中的各部分無個體差異的碳水化合物部分組成的(參考文獻3)。另一方面，RA患者血清IgG的Fc區的碳水化合物鏈總的來說具有的半乳糖的含量明顯降低了，但是同志愿參加的健康人一樣也是由具有微觀不均一性的而其各部分又無個體差異的各種碳水化合物鏈所組成的。具體講，已發現三種鏈，其含二個、一個或無半乳糖分子的每一種鏈以2∶2∶1的比例存在于自愿參加的健康人血清IgG的Fc區中，而RA患者血清IgG的含兩個半乳糖分子的碳水化合物鏈的含量明顯減少了，且半乳糖缺失的碳水化合物鏈的總量增加了許多(參考文獻2)。這些結果告訴人們RA患者血清IgG的碳水化合物鏈是由于結構上引起的反常。這樣，如果能弄清楚其結構上的反常，此IgG便可作為RA的標志(參考文獻4)。

下述的四份參考文獻詳細披露了上述發現，本發明考慮了這些參考文獻：

1)Kunkel，H.G.和Tan，E.M.(1964)：自身抗體和疾病。現代免疫學，第4期351頁。

2)Mizuoehi，T，Taniguchi，T.，Matsuta，K.，等人(1985)：類風濕性關節炎和原發骨關節炎同各種血清IgG糖基化作用類型變化之間的關系，Nature第316期，452-457頁。

3)Mizuochi，T.，等人(1982)：免疫學雜志，第129期2016-2020頁。

4)Mizuochi，T.(1985)：對類風濕性因子的反應物：類風濕性關節炎患者IgG的糖鏈中的反常，臨床免疫學，第17期，977-984頁。

如上所述，大家已知道，如果能夠測定血清IgG?Fc區的碳水化合物中的半乳糖缺失便能對RA進行診斷。然而，迄今為止還沒有測定半乳糖缺失的實用的診斷劑。

鑒于上述情況，本發明的發明人認為本發明要予解決的問題在于提供一種測定人血清中存在的IgG碳水化合物鏈中半乳糖缺失的診斷劑。

為了解決上述問題本發明的發明人已進行了廣泛研究并發現在血清中加入蛋白質A或G后再加入一種帶標記的植物血凝素，所說目的便能達到。本發明的目的正是基于這一發現而實現的。也就是說，本發明涉及含蛋白質A或G和一種帶標記植物血凝素作為主要成分的診斷類風濕性關節炎用診斷劑。即本發明涉及一組試劑(二種物質)，所說試劑為蛋白質A或G和帶標記的植物血凝素，此組試劑能用于測定半乳糖缺失。

本發明提供了用上面定義的診斷劑測定半乳糖缺失的方法，此方法包括將蛋白質A或G同血清反應，把所得反應物同標記植物血凝素反應及進行顯色這樣一些步驟。

下面將對本發明作較詳細的介紹。

本說明書中所用的術語“類風濕性關節炎”屬于自體免疫疾病，而其在早晨出現的特殊癥狀是僵硬。

本說明書中所用的術語“蛋白質A”是從金黃色葡萄球菌的細胞膜中分離出來的蛋白質，它是由分子量為42,000的單多肽所構成的并且其內部結構彼此類似的若干部分所組成。

蛋白質A有與IgG的Fc區結合的性質。這樣便可以利用這一性質來純化IgG，事實上這已是一公知的技術。

同蛋白質A一樣，蛋白質G是從金黃色葡萄球菌中分離出來的一種蛋白質，它具有與IgG的Fc區結合的性質，利用這一性質來純化IgG，事實上這也是一公知技術。