[其他]亞葉酸的分離方法

無效

• 申請號: 88102709
• 申請日: 1988-05-11
• 公開（公告）號: CN88102709A
• 公開（公告）日: 1988-12-28
• 發明（設計）人: 穆勒·漢斯·魯道夫;尤利曼尼·馬丁;康蒂·約瑟夫;穆爾德·岡特
• 申請（專利權）人: 阿潑洛發公司
• 主分類號: C07D475/08
• 分類號: C07D475/08
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利代理部
• 代理人: 全菁

本發明涉及制備（6S）-亞葉酸及其鹽，特別是亞葉酸鈣、鎂、鉀和鈉鹽的方法。

亞葉酸是N-[5-甲酰基-（6R，S）-5，6，7，8-四氫-蝶酰]-L-谷氨酸（5-CHO-（6R，S）-H????PteGlu（蝶酰谷氨酸））。N-[5-甲?；?（6S）-5，6，7，8-四氫-蝶酰]-L-谷氨酸（5-CHO-（6S）-H????PteGlu（蝶酰谷氨酸））是嗜橙菌因子（＝檸膠鏈環球菌的生長促進因子）。

亞葉酸含有二個不對稱中心。而且，由于亞葉酸是由葉酸，即N-（蝶酰）-L-谷氨酸合成的，所以在其谷氨酸基團中含有的旋光性碳原子以L形式存在，而由5，6位上雙鍵加氫產生的旋光性碳原子在6位上以外消旋（6R，S）形式存在。因此，合成的亞葉酸（二甲酰四氫葉酸）由兩種非對映體1∶1的混合物組成。

在化學治療中，無論作為一種用于治療巨成紅細胞葉酸缺乏癥，即貧血癥的藥物制劑，還是作為一種具有下述增強作用的解毒藥，甲酰四氫葉酸的重要性都日益提高了;在癌癥治療（甲酰四氫葉酸治療）和諸如牛皮癬及類風濕關節炎一類自體免疫疾病的治療中，增強葉酸拮抗劑耐受性，特別是增強氨蝶呤和甲氨蝶呤耐受性和增強甲氧芐氨嘧啶-磺胺甲基異惡唑等某些抗寄生物劑的耐受性。

據發現，亞葉酸在例如肝中的天然狀態下只以S形式存在。作為葉酸輔助因子的甲酰四氫葉酸的生物化學作用，依賴于其5-CHO（6S）-H₄PteGlu的含量。另一方面，其反（R）式，即5-CHO（6S）-H PteGlu卻幾乎不代謝，而是通過尿慢慢排出，它在生物化學上無活性（J.A.Straw等，《癌研究》，44，3114頁，1984年）。

因此，人們做了許多試驗，以便分離5-甲?；?（6R，S）-5，6，7，8-四氫-蝶酰-L-谷氨酸，不對稱地合成5-甲酰基-（6S）-5，6，7，8-四氫-蝶酰-L-谷氨酸和離析出所說的生理活性形式的。在D，Cosulich等人于《美國化學會志》（74，4215-4216頁，1952年）中以及在美國專利說明書2688018中，試驗了自水溶液中用分步結晶法分離5-甲?；?（6R，S）-5，6，7，8-四氫-蝶酰-L-谷氨酸鈣或鍶等堿土金屬鹽。但是，在B.Cosulich等人公開的條件下不能實現所需的分離。在PH7～8的水中，例如對5-甲?；?（6R，S）-5，6，7，8-四氫-蝶酰-L-谷氨酸鈣鹽進行結晶時，總是再次獲得純的（6R，S）型物質，利用手性高效液體色譜柱進行色譜分析并且對照旋光度可以定量證明這一點。在這種情況下，結晶時使用的5-CHO（6R，S）-H₄PteGlu鈣鹽是否純并不是關鍵，回收得到的總是光學純的（6R，S）-型物質。（6R、S）-亞葉酸堿土金屬鹽的過飽和水溶液中如果加入真實的（6S）-亞葉酸堿土金屬鹽，則既不能分離也不能濃集該（6S）型物質。所以迄今為止，不對稱合成法依然僅僅有可能用來制備N-[5-甲酰基-（6S）-5，6，7，8-四氫-蝶酰-L-谷氨酸。

然而，過去已知的合成不對稱（6S）-亞葉酸種種方法并不適于在工業規模上制備這種化合物。因此，到目前為止尚未出現制備（6S）-亞葉酸用的切實可行的工業方法。

因此，目交的問題是要開發一種制備（6S）-亞葉酸及其鹽的簡單、有效、成本低的工業方法。

令人驚奇地發現，在無機或有機堿存在下的堿性環境中，最好自水中使（6R、S）-亞葉酸的堿土金屬鹽重結晶時，例如使N-[5-甲酰基-（6R，S）-5，6，7，8-四氫-蝶酰]-L-谷氨酸鈣、鎂或鍶鹽（＝（6R、S）-亞葉酸堿土金屬鹽）重結晶時，（6S）-型物質的結晶開始占優勢，而且在得到的結晶中（6S）-型物質含量可達到85%或更高。

在近中性PH下，最好自水中通過進一步重結晶，可以把富含（6S）-型物質并且有高（6S）-型物質含量的亞葉酸堿土金屬鹽，轉化為旋光純的（6S）-亞葉酸堿土金屬鹽。

在結晶期間，加入堿土金屬離子，例如鈣、鎂或鍶的氯化物，可以提高產率。

因此，本發明目的在于提供一種制備（6S）-亞葉酸及其鹽的方法，其中包括使（6R、S）-亞葉酸堿土金屬鹽重結晶，必要時自所說的亞葉酸堿土金屬鹽中釋放出所說的酸和（或者）在必要時轉化為堿金屬鹽，其特征在于所說的重結晶是在堿存在下進行的。

本發明的目的還在于提供這樣一種方法，其中使所得到的結晶在堿存在下或者在近中性PH值下至少再進行一次重結晶。按照本發明的一種優選的具體實施方案，在添加的堿土金屬離子存在下進行所說的重結晶。