[其他]豬肺炎支原體(M.hyopneumoniae)抗原及其應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 88101554
• 申請日: 1988-03-25
• 公開（公告）號: CN88101554A
• 公開（公告）日: 1988-11-02
• 發(fā)明（設計）人: 達里爾·H·福茲;米米·維舒特;埃米麗·布魯克斯
• 申請（專利權(quán)）人: ML技術(shù)投資有限公司
• 主分類號: A61K39/02
• 分類號: A61K39/02
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利代理部
• 代理人: 李瑛

本發(fā)明所涉及的是豬肺炎支原體，確切地說是豬肺炎支原體抗原，更進一步確切地說，本發(fā)明涉及的是一種預防支原體肺炎，尤其是豬的支原體肺炎的疫苗。

由豬肺炎支原體引起疾病（尤其發(fā)生在豬），遍及全芥世界，并且是一種與豬的損失有關(guān)的疾病。這種病常導致低能的、發(fā)育不良的和多病的動物。患病豬常常易受機會微生物的續(xù)發(fā)感染。

人們有許多嘗試，想要提供一種預防豬患支原體肺炎的疫苗。然而，對這種疫苗一直沒有獲得成功。

Kristensen等（Am.J.Vet.Res.42（1981）P.784）發(fā)現(xiàn)，注射加熱失活的豬肺炎支原體細胞后，并沒有預防豬患支原體肺炎的作用。

Etheride等（Res.Vet，Sci????33（1982）P.188）發(fā)現(xiàn)，用一種活疫苗通過靜脈注射、皮下注射或腹腔注射，能不完全性地保護肺和不完全的支原體集落生成。

Ross等（Am.J.Vet.Res????45（1984）P.1899）揭示了使用通過凍融法制備的豬肺炎支原體提取物，只能提供不穩(wěn)定的保護作用。在某些情況下，還可加重疾病的發(fā)展。Ross等也聲稱，給豬注射這種提取物，在一定程度上可保護氣管內(nèi)不受注射4ml肺炎肺組織清液及1ml????VPP-11菌液的挑戰(zhàn)，肺炎肺組織清液來自于10%的肺炎肺懸液;該肺中含有VPP-11菌株，菌液來自于該菌株傳代15-20次的24小時培養(yǎng)物。

從目前的結(jié)果看，還沒有生產(chǎn)出一種預防豬支原體肺炎的有效疫苗。

本發(fā)明的一個方面，就是要提供一種預防支原體肺炎，特別是豬患的支原體肺炎的疫苗及方法。

確切地說，本發(fā)明的一個方面，提供的是一種預防支原體肺炎的疫苗，此疫苗含有一種或多種豬肺炎支原體抗原及其片段，在這些疫苗中的豬支原體抗原或其片段基本上不含有具有免疫抑制活性物質(zhì)。因而缺乏免疫抑制活性。

申請者已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，引起豬患支原體肺炎的病原體含有多種抗原，其中一些具有免疫抑制活性，另一些缺乏免疫抑制活性。同時申請者進一步發(fā)現(xiàn)使用缺乏免疫抑制活性的基本上僅只含豬肺炎支原體抗原和/或其片段的疫苗，可有效地用于預防支原體肺炎，特別是防止豬患支原體肺炎。

例如，一種用于測定化合物或其成份是否具有免疫抑制活性的方法，已由Suter，M.，Kobisch，M和Nicolet在Infect，and????Immun，49（1985），P.615中作了報導，“含免疫球蛋白的細胞的刺激作用和同型特異抗體在用無特殊病原體豬所做的實驗性豬肺炎支原體感染的反應。所選用的方法見實施例3。

疫苗中所應用的豬肺炎支原體抗原可從豬肺炎支原體的病原體上獲得，特別是從豬肺炎支原體病原體膜上獲得。正如上述所指的那樣，豬肺炎支原體病原體，特別是它的膜，含有兩種抗原，此兩種抗原分別具有和不具有免疫抑制活性。因此，為獲得制備疫苗所需的抗原，必須選擇收取缺乏免疫抑制活性的那部分豬肺炎支原體抗原。

根據(jù)一種方法，豬支原體肺炎病原體膜可用一種溫和去垢劑處理，尤其是用一種非離子型去垢劑處理，來得到可溶性和非可溶性成分。申請者發(fā)現(xiàn)，非可溶性成分含有缺乏免疫抑制活性的豬肺炎支原體抗原，而用溫和去垢劑處理而得到的可溶性成分，不僅含有缺乏免疫抑制活性的豬肺炎支原體抗原，且還含有具有免疫抑制活性的物質(zhì)。用溫和去垢劑處理豬肺炎支原體膜而得到的非溶解性部分，可以用來制備疫苗預防動物患支原體肺炎，或選用經(jīng)過處理，去掉了的具有免疫抑制活性物質(zhì)的可溶性部分來制備疫苗。

為了進一步篩選，用能選擇性地溶解具有免疫抑制活性的表面抗原的其它試劑來處理豬肺炎支原體病原體膜，可得到一種含有缺乏免疫抑制活性的豬肺炎支原體抗原的非可溶性部分。其它溶解劑的代表性實例，可以提到的是：N-辛基葡萄糖苷;脫氧膽酸鈉;CHPAS（3-[（3-膽酰胺丙基）-二甲基氨]-1-丙烷磺酸鹽，等。

用于生產(chǎn)預防支原體肺炎疫苗而需獲得缺乏免疫抑制活性的豬肺炎支原體抗原的方法的另一實例，所涉及的是電泳方法。用其可分離出各種豬肺炎支原體膜抗原，以致得到一種或多種缺乏免疫抑制活性的抗原。

對本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，上述及其它方法是顯而易見的。