[其他]重組產品

無效

• 申請號: 87102725
• 申請日: 1987-03-29
• 公開（公告）號: CN87102725A
• 公開（公告）日: 1987-11-11
• 發明（設計）人: 東尼·瑪麗·安塔利斯;馬斯·邁克爾·巴恩斯;米歇爾·艾莉森·克拉克;彼得·倫納德·迪瓦因;尼爾·霍華德·戈斯;菲利普·拉爾夫·萊爾巴赫
• 申請（專利權）人: 澳洲生物科技公司;澳大利亞國立大學
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12P21/02;A61K39/395;A61K49/00
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 羅宏

本發明涉及到用重組DNA技術生產一種新的人蛋白—滅活素(minactivin)及其基因DNA序列的確定，以及具有生物活性的滅活素在重組宿主中的大量表達及純化。本發明也涉及到有生物活性的天然滅活素及其多肽的純化和它們的氨基酸順序。

滅活素(DAI-2)是一種天然存在的尿激酶型血纖維蛋白溶酶原激活物的失活劑。這一類型的血纖維蛋白溶酶原激活物在許多主要的人癌尤其是肺、結腸、乳腺及前列腺癌中其含量異常高。血纖維蛋白溶酶原激活物是一些絲氨酸蛋白酶，它們參與細胞轉位、遷移和侵襲中的蛋白多級降解過程。因此，它們似乎是與組織的破壞和重建有關，并參于了腫瘤的生長和轉移，也可能在炎癥反應中起作用。

血纖維蛋白溶酶原激活物一般有兩種類型：1)尿激酶型及2)組織型。組織型血纖維蛋白溶酶原激活物主要見于血和血管壁中，它負責激活血纖維蛋白溶解的防衛系統防止血栓形成。尿激酶型血纖維蛋白溶酶原激活物在正常的血栓溶解過程中不起作用，但它卻參與侵襲和組織破壞的病理變化，尤其是參于腫瘤轉移和炎癥反應的病變過程。

已報道的幾種血纖維蛋白溶酶原激活物的特異性抑制劑，其中有自胎盤中分離的抑制劑(Holm?berg，L.Biochim.Biophys.Acta?544，128-137(1978))和在培養的血管內壁細胞中產生的抑制劑(PAI-1)(Vam?Mourik，J.A,，Lawrence，D.A.，Loskutoff，D.J.，J.Biol.Chem.259，14914-14921(1984))。滅活素發現于人血單核細胞和U937細胞中，并與來自胎盤的抑制劑呈免疫學相關。這些抑制劑彼此之間的關系目前還不清楚。??

滅活素也象大多數其他有生物活性的蛋白一樣，在體內的產生量是非常低的。因此難以用常規的生化方法進行純化和鑒定。為進一步評價它的性質和在臨床應用中的功效，需要制備大量的純品。利用重組DNA技術，即通過把這種基因克隆到另一宿主如細菌或動物細胞中中，以獲得這一蛋白產物。為了克隆這一基因，需先對能獲得的少量的天然滅活素純化成均質，以便制備抗體，獲得肽段及氨基酸順序和合成寡核苷酸。從而為克隆路線提供依據。

????????????????????縮寫詞

HPLC：????高壓液相色譜

Mr：??????相對分子量????

MW：??????分子量????

PMA：?????十四酰佛波乙酸酯(4-Phorbol-12-myris-

??????????tate-13-acetate)

SDS-PAGE：十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳

TFA：?????三氟醋酸(trifluoracetie)

HPA：?????人血纖維蛋白溶酶原激活物

bp：??????堿基對

Kb：??????千堿基對????

PU：??????Ploug????

本發明的首要實施是提供一種DNA順序，它包含作為為滅活素氨基酸順序編碼的全部、部分、類似物、同源物、衍生物或其組合的第一DNA順序，和同所述第一DNA順序雜交的DNA順序，及一種由突變(包括單個或多個堿基替換、缺失、插入和倒位)產生的與上述第一DNA順序有關或能夠雜交的DNA順序，或者是在表達時為滅活素多肽編碼的全部、部分、類似物、同源物、衍生物或其組合的一種DNA順序，或者它所編碼的多肽能顯示出與滅活素有類似的免疫學或生物學活性。該順序為：

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