[其他]一種新型的細胞電融合專用儀

無效

• 申請號: 86202617
• 申請日: 1986-10-23
• 公開（公告）號: CN86202617U
• 公開（公告）日: 1987-12-16
• 發明（設計）人: 胡華旦;王樹德;孫萬華
• 申請（專利權）人: 北京師范大學
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;H03K3/00
• 代理公司: 北京師范大學專利事務所
• 代理人: 邢鐘琪,吳圣谷

本實用新型屬生物遺傳工程領域中專用電子儀器技術領域（IPC分類C12N15／00；HO3K3／00）

細胞電融合技術是八十年代初才發展起來的利用物理手段進行遺傳基因研究，組織培養新物種的有力手段。但通常采用的是將高頻發生器、高壓脈沖發生器、示波器等若干臺普通型號的電子儀器與臨時附加的電路拼湊起來進行的。（參考文獻Hubertus????Kohn.Rudoif????Schieder????and????Otto????Schieeler????《Somatic????hybrids????in????Tobacco????Mediated????by????Electrofusion》Plant????Science。38（1985）121－128。Elsevier????Scientific????Publishers????Ireland????Ltd）其設備零散且代價高，操作麻煩，測量的穩定性差，數據不準確。同時高壓脈沖電場是采用電容放電的方式取得，其脈沖呈尖波形。由于各種細胞溶的等效電阻值相差很大，以及受電極的分布電容影響，實際施加在溶液中的電場將大大減弱，并難以確切知道此脈沖電場的幅度及寬度。

本實用新型的目的在于設計一種供細胞融合專用的新型電子儀器。它所產生的高頻電場的幅度與頻率，高壓脈沖電場的幅度與寬度以及脈沖的個數，可在一定的范圍內任意調節，并能顯示它們的數值；同時采用微處理器進行自動程控，以適應不同種類的細胞（動物，植物，酵母等）進行電融合的需要，操作力求簡單，方便，可靠。為研究工作提供一種實用的專用儀器。

本實用新型由下面各部分組成。

（1）由次級繞組帶抽頭的電源變壓器供電的兩組高壓直流電源串聯起來，加上高反壓大功率晶體管3DD104〔2〕及運算放大器LM318組合成一個其輸出電壓可在幾十伏到千伏以上范圍內分檔連續調節的高壓穩定直流電源〔1〕。

（2）此高壓直流電源通過串聯起來的高反壓大功率晶體管3DD104〔2〕及繼電器觸點接到融合儀的輸出端OUTPUT、高反壓管及繼電器均有單片微處理器〔7〕控制。當兩者都導通時，融合池中就得到高壓脈沖電場。

（3）由門電路74LSOO，晶體管3DK7及電位器組成的RC高頻振蕩器〔3〕，其頻率可幾十千赫到幾兆赫范圍內由電位器調節。再徑功率放大器接到融合儀輸出端OUTPUT，當另一繼電器接通時，融合池中就得到高頻交變電場。

（4）由Intel????8039微處理器〔7〕，2716或2732只讀存貯器ROM〔6〕及接口組件組成的總控制電路。它使高頻交變電場及高壓脈沖電場按用戶預定的時間間隔和循環次數，交替地施加在融合池的電極〔12〕、〔13〕上，（其脈沖波型為圖3所示）并能自動地完成全過程。這種低阻大功率的方波脈沖，可從根本上消除了尖波所帶來的缺點。

（5）由9個鍵盤按鍵組成的鍵盤通過Intel????8039微處理器〔7〕的軟件進行參數的預置。可設置高壓脈沖的寬度、脈沖的個數及脈沖間的間歇時間；還可控制啟動和中斷過程的進行，并選擇LED數碼管顯示出相應的參數值。

（6）用3 1/2 數字電壓表DPM7100通過切換繼電器電路〔5〕來顯示高壓脈沖電源的幅度，實際施加在溶液上的脈沖幅度或高頻交變電場的幅度。在測量電極上〔12〕、〔13〕的實有脈沖幅度時，是通過由高速運算放大器318及場效應管FET組成的高速采樣保持電路SAMP、HOLD〔9〕來實現的。

（7）顯示脈沖寬度，脈沖個數，間歇時間及高頻交變電場的頻率測量。由Intel????8039微處理器〔7〕及其軟件控制，3位LED數碼管〔11〕來實現的。

（8）從儀器上用電纜線引出一個輔助鍵盤〔20〕，其功能與主鍵盤〔7〕相同，用以在無菌操作手套箱內控制融合儀。

（9）Intel????8039微處理器還控制一個音響裝置（蜂鳴器）〔8〕，以便用聲音來指示高壓脈沖出現的時刻。使用戶在顯微鏡下觀察細胞融合情形時憑聽覺來判斷過程的開始與結束。

（10）用工程塑料，硅橡膠，玻璃等材料做成具有適當容量（通常是1毫升）的融合池（圖2）以盛放細胞溶液。并在融合池裝入用不銹鋼或白金絲做成的互相絕緣的兩個電極〔12〕、〔13〕并做成平行板式以得均勻電場。具體尺寸可視實驗需要選擇。這種融合池可做成開放式〔圖2a〕和密封式〔圖2b〕兩種。密封型的用注射器取放溶液、并可在設置的玻璃窗上用顯微鏡進行融合的觀察。融合池的電極通過導線或高頻電纜接到融合儀的輸出端OUTPUT。