[其他]生產2-酮基-D-葡糖二酸的方法

無效

• 申請號: 86108590
• 申請日: 1986-12-25
• 公開（公告）號: CN86108590A
• 公開（公告）日: 1987-09-23
• 發明（設計）人: 白藤英夫;山口高正;野上昱雄
• 申請（專利權）人: 武田藥品工業株式會社
• 主分類號: C12P19/02
• 分類號: C12P19/02;//;C12R101)
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利代理部
• 代理人: 辛敏忠,顧柏棣

本發明是關于發酵生產2-酮基-D-葡糖二酸（見式1）的方法，該酸可很好地用作飼料，洗滌劑，粘合劑，混凝土增塑劑的濃縮鈣添加劑及用于糖類代謝研究的試劑。

（Ⅰ）

以前只有一種生產2-酮基-D-葡糖二酸的方法。該方法中在銅綠假單胞菌作用下，將通過化學氧化葡萄糖合成的D-葡糖再二酸通過微生物氧化得到2-酮基-D-葡糖二酸。（見捷克斯洛伐克專利N.222577，1984年2月1日）。

上述獲得專利的方法需要通過化學氧化來合成D-葡糖酸，但從產率的角度它不是令人滿意的工業生產技術。

由于研究了微生物氧化單糖機制，本發明者發現當把從土壤樣品中分離的某種菌株CK59ls，12-5，12-15，12-4，或22-3）培養在含D-葡萄糖，D-果糖和/或其它單糖作為碳源的培養基中時，所得培養液中產生和積累了可觀量的2-酮基-D-葡糖二酸。本發明者還對這些細菌進行了分類學研究，發現它們是屬于一個新屬的一些新菌株。本發明即是進一步研究的結果。

也就是說，本發明提供了一種生產2-酮基-D-葡糖二酸的方法，它包括將式（Ⅱ）所示化合物與屬于擬葡糖酸桿菌屬細菌接觸，該化合物及接觸過程轉化的其它化合物可被氧化，從而產生和積累2-酮基-D-葡糖二酸，然后再回收產物。

該化合物如下式Ⅱ

（Ⅱ）

其中R₁是-CHO，-CH₂OH或-COOH;R₂是H或。

菌株K5915，12-5，12-15，12-4和22-3都是從分別在日本Wakayama????Prefecture和shiga????Prefecture收集的土壤樣品中分離出的。這5個菌株每株都具有下列分類學特征：

K59ls和12-5菌株的分類學特征：

（a）形態學特征：

（1）桿狀，大小為0.3～0.5×0.7～1.4微米。

（2）無細胞多形態性。

（3）靠2到4根極生鞭毛游動。

（4）不形成孢子。

（5）革蘭氏陰性。

（6）不抗酸。

（b）在各種不同培養基的生長狀態：

（1）營養瓊脂平皿上培養：基本上不生長。培養在酵母浸出物營養瓊脂平板上時，形成圓形，全緣，光滑的乳光菌落。

（2）在酵母浸出物營養瓊脂斜面上培養：適度生長，呈線性，光滑的乳光菌落。

（3）在酵母浸出物營養液中培養：適度生長，整個培養液均勻混濁。

（4）營養白明膠穿刺培養：上部稀疏生長，白明膠未被液化。

（5）石芯牛乳：酸化，凝固。

（c）生理學特征：

（1）硝酸鹽還原：較弱的陽性。

（2）沒有發現反硝化作用。

（3）甲基紅（MR）試驗陽性。

（4）伏-普（Voges-Proskauer）試驗陰性。

（5）不產生吲哚。

（6）不產生硫化氫。

（7）不水解淀粉。

（8）檸檬酸鹽利用：陰性。

（9）利用銨鹽。

（10）不產生色素。

（11）產生脲酶

（12）氧化酶試驗：陽性。

（13）過氧化氫酶試驗：陽性。

（14）生長在16℃到36℃間，最適溫度為24-34℃，可生長在PH5.5到8.7間，最適PH是6.0-7.5。

（15）需氧。

（16）在Hugh-Leifson氏試驗中氧化。

（17）從L-阿拉伯糖，D-木糖，D-葡萄糖，D-果糖，D，半乳糖，D-甘露糖，D-麥芽糖，蔗糖，乳糖，海藻糖，D-甘露醇和甘油醇中產酸而不產氣。但從D-山梨醇，肌醇或淀粉既不產酸也不產氣。

（d）其它特征：

（1）從乙醇中微量產乙酸。

（2）生長需要生物素，硫胺素，核黃素和輔酶A（co????A）。

（3）從甘油醇中產生二羥丙酮。

（4）DNA中的G+C含量為67±1摩爾%。

（5）具有含10個異戊二烯單位的輔酶Q（Co????Q10）。

（6）抗鏈霉素。

菌株12-15的分類學特征：

（a）形態學特征：

（1）桿狀，細胞大小為0.3～0.5×0.7～1.4微米。

（2）無細胞多形態性。

（3）靠2到4根極生鞭毛游動。

（4）不形成孢子。

（5）革蘭氏陰性。

（6）不抗酸。