[其他]雜交瘤細(xì)胞系及其產(chǎn)生的抗人多能粒細(xì)胞集落刺激因子單克隆抗體

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 86107666
• 申請日: 1986-12-08
• 公開（公告）號: CN86107666A
• 公開（公告）日: 1987-09-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 戴維·張;布魯斯·阿特羅克
• 申請（專利權(quán)）人: 柯瑞英-艾格公司
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;A61K39/395;G01N33/53;G01N33/577
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 王巍

一般地說，本發(fā)明涉及在分離和定量檢測生物性液體中造血生長因子的免疫學(xué)技術(shù)中所應(yīng)用的材料和方法。具體地說，就是包括由新的雜交瘤細(xì)胞系（以A.T.C.C.HB-8957，A.T.C.C.HB-8958，A.T.C.C.HB-8959，A.T.C.C.HB-8960，A.T.C.C.HB-8961和A.T.C.C.HB-8962為例）產(chǎn)生的、能與造血生長因子起特異性反應(yīng)的單克隆抗體，以及應(yīng)用這些抗體在親和純化技術(shù)中分離造血生長因子，檢測造血生長因子和應(yīng)用免疫學(xué)技術(shù)研究這些生長因子。更明確地說，本發(fā)明涉及與天然的和重組的人多能粒細(xì)胞集落刺激因子（hpG-CSF）特異性反應(yīng)的單克隆抗體。

人的成血（造血）系統(tǒng)負(fù)責(zé)各種白細(xì)胞（包括中性白細(xì)胞，巨噬細(xì)胞及嗜堿細(xì)胞/肥大細(xì)胞），紅細(xì)胞和凝血形成細(xì)胞（巨核細(xì)胞/血小板）的更新。據(jù)估計，一般男性成人的造血系統(tǒng)每年生4.5×10¹¹左右的粒細(xì)胞和紅細(xì)胞，這相當(dāng)于每年將全部體重更新一次。Dexter等，BioEssays，2，154-158（1985）。

據(jù)信，小量祖始“干細(xì)胞”向各種血細(xì)胞系的分化以及這些血細(xì)胞系驚人的增殖和最終分化成為成熟的血細(xì)胞都是由少量的特定造血生長因子所負(fù)責(zé)。因為造血生長因子僅以極微量的形式存在，迄今為止檢測與鑒別這些因子所應(yīng)用的一套方法，都僅是根據(jù)不同因子對人工培養(yǎng)細(xì)胞的不同刺激效應(yīng)來區(qū)分它們。結(jié)果，創(chuàng)造出大量的名稱來命名實際上數(shù)目很少的因子。由此造成的混亂可從下面的例子中窺見一斑：IL-3（白細(xì)胞介素3），BPA（多集落促發(fā)活性），multi-CSF（多集落刺激因子），HCGF（造血細(xì)胞生長因子），MCGF（肥大細(xì)胞生長因子）和PSF（P細(xì)胞刺激因子）等，目前認(rèn)為這些皆適用于一種鼠類造血生長因子的縮寫詞。Metcalf，Science，229，16-22（1985）。

遺傳重組技術(shù)的應(yīng)用已從這種混亂中獲得某些條理。例如，刺激產(chǎn)生紅細(xì)胞的人紅細(xì)胞生成素的氨基酸和脫氧核糖核酸的順序已被獲得（見Lin，PCT公布的85/02610號申請書1985年6月20日公布）。重組方法也已被用于分離人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）和人巨噬細(xì)胞特異性集落刺激因子（CSF-1）的互補(bǔ)脫氧核糖核酸（見Lee等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.82，4360-4364（1985）;Wong等，Science，228，810-814（1985）和Kowasaki等，Science，230，291-296（1985）。

一個稱為人多能集落刺激因子（hpcsf）或多能生成素（pluripoietin）的人造血生長因子已被證明存在于命名為5637的人膀胱癌細(xì)胞系的培養(yǎng)基中，該細(xì)胞系在一些限制性條件下寄存在馬里蘭州羅克維爾的美國典型培養(yǎng)物收集中心（American????Type????Culture????Collection），貯存號為HTB-9。據(jù)報告從該細(xì)胞系純化的人多能集落刺激因子在用人骨髓原祖細(xì)胞所進(jìn)行的測定中刺激了多能祖始細(xì)胞的增殖和分化，最終導(dǎo)致所有主要類型血細(xì)胞的產(chǎn)生。Welte等，Proc.Natl.Acad.Sci（USA），82，1526-1530（1985）。

初步研究表明在人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落形成單位試驗的頭7天期間，被鑒定為人多能集落刺激因子，主要具有粒細(xì)胞集落刺激活性。