[其他]集落形成刺激因子的制造方法

無效

• 申請號: 86107102
• 申請日: 1986-10-17
• 公開（公告）號: CN86107102A
• 公開（公告）日: 1987-08-12
• 發明（設計）人: 森本和郎;河富芳明;川野武彥;西田正行
• 申請（專利權）人: 株式會社綠十字;森永乳業株式會社
• 主分類號: A61K37/04
• 分類號: A61K37/04;A61K35/22
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利代理部
• 代理人: 孫令華,林柏楠

本發明是關于以高收率，高純度含有集落形成刺激因子（以下簡稱CSF）的人尿中回收CSF的方法。

CSF是以極微量存在于人尿中的生理活性物質，是作用于骨髓中前驅細胞促進白血球組成細胞處的顆粒球及單球巨噬細胞分裂、增殖的糖蛋白，可期望有治療白血球降低癥的藥效。

作為CSF的精制方法有采用吸附劑的方法，陰離子交換體的方法及采用超濾膜的方法等。

在人尿中由于CSF含量極微，使CSF有效地分離、濃縮和精制是困難的。例如以往經常采用的使硅酸鹽、硅藻土等礦物與尿接觸，吸附CSF，然后使CSF溶出的方法，利用各種陰離子交換色譜來回收的方法。它們的缺點是操作復雜，且因一次所能處理的尿也有限，大量回收微量或分CSF，其成本必然很高。

例如，在采用各種陰離子交換體的色譜法中，柱體法的吸附劑的填充及分批法的利用過濾或離心分離回收吸附等操作都是很復雜的，因而，它們作為大規模有效獲取CSF的方法是有缺點的。

再者，尿中有許多雜質，采用以往的方法，這些雜質很容易與CSF一起被回收，這對后續的精制工序是十分不利的。

本發明的目的就是提供一種從含有微量的來自尿的CSF，并且含有許多雜質的溶液中以高收率，高純度，低成本且操作簡單的回收，制造CSF的方法。

本發明的目的是提供一種精制來自人尿中的集落形成刺激因子的方法，其特征是將以纖維素來為基質的片狀原料卷成螺旋狀結構，制成濾筒，作為陽離子交換體，用這種陰離子交換體來處理含有來自人尿的集落形成刺激因子的溶液。

本發明中所用的含CSF的溶液，并不只限于CSF的水溶液，例如含微量CSF旦有大量雜質的尿液等也可應用。

作為陰離子交換體，如二乙氨乙基-葡聚糖凝膠，季銨乙基（QAE基）-葡聚糖凝膠、二乙氨乙基-纖維素、季銨乙基-纖維素、二乙氨乙基-セファロ-ス，二乙氨乙基-セファセル，スフェロッル-DEA等均可采用，但最好采用含有陰離子交換基的纖維素為基質的片狀原料卷成螺旋形，制成濾筒，較為有利。

將通用載體（如纖維素，葡聚糖瓊脂糖）用乙烯聚合物交聯，再導入季銨乙基，二乙氨乙基（DEAE基），三乙氨乙基（TEAE基），氨乙基（AE基），胍基乙基（GE基）等（離子交換基體參閱圖1），將其卷成螺旋狀即可制成上述結構的濾筒。其最好形狀如圖2所示。在圖2中，1為離子交換基體（層厚0.1-1mm），2為透水性支持體（層厚0.1-1mm），該支持體最好采用網格狀或編織狀，其材料可采用如聚苯乙烯、尼龍、聚碳酸酯、聚縮醛、聚四氟乙烯樹脂、不銹鋼等。

圖3是使用該結構的精制方法實施例的一個剖面圖，從入口3進入的CSF液體，從外圍向中心部4聚集，從出口5排出。箭頭所指為CSF液的流動方向，6為放氣孔，7為排出口。圖4為橫截面圖，為從外圍進入的CSF液體向中心聚集的狀態。

作為本發明的使用條件，含CSF的液體最好在pH值為5～7，導電度為20ms/cm（25℃）以下經過圓筒，而使CSF被吸附。在這樣的條件下，CSF被吸附，大部分雜質不被吸附而直接通過。然后，用pH為5～7的稀鹽溶液〔例如：導電度為20ms/cm（25℃）以下的磷酸緩沖溶液〕洗滌。用這種洗滌操作，可進一步除去雜質，而CSF仍原樣吸附而殘留下來。

為使吸附的CSF溶出，通入pH為5～9的濃鹽溶液〔例如：導電度為30ms/cm（25℃）以上的磷酸緩沖劑，食鹽溶液〕就很容易地達到目的。

在本發明中，最好進一步利用起濾膜進行處理。超濾膜的處理，在前述陰離子交換體處理前進行。

作為超濾膜，最好采用能除去較CSF小的低分子物質的超濾膜（即用于分離低分子量者）及能除去比CSF大的高分子物質的超濾膜（即用于分離高分子量者）中的一種，或兩種都用。用作分離低分子量者，通常采用1×10⁴～4×10⁴道爾頓的超濾膜。用作分離高分子量者，通常用10⁵～10⁶道爾頓的超濾膜。作為超濾膜，最好采用聚丙烯腈類超濾膜和聚砜類超濾膜及纖維素系超濾膜等。

含有CSF的溶液，通過超濾膜時的條件通常為：

處理液的pH值為5～8

操作壓力為1～5kg/cm²

本發明的超濾膜處理法，可用于CSF的回收、制取中的任一工序，但最好先用分離低分子量的超膜濾膜進行處理，然后再用分離高分子量的超濾膜進行處理。