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[其他]雜多糖S-657無效

專利信息
申請號: 86104449 申請日: 1986-06-27
公開(公告)號: CN86104449A 公開(公告)日: 1987-01-21
發明(設計)人: 杰里·A·派克;蘇姍娜·M·斯延伯根;喬治·T·維德 申請(專利權)人: 麥克公司
主分類號: C12P19/04 分類號: C12P19/04;//
代理公司: 中國專利代理有限公司 代理人: 李雒英
地址: 美國新澤*** 國省代碼: 暫無信息
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 雜多 657
【說明書】:

本發明是關于微生物多糖類方面的。人們知道,在這個方面某些微生物具有一個共同特征,那就是能產生細胞外的雜多糖。雜多糖通常為高分子量的線性碳水化合物多聚體,含有兩種或兩種以上類型的單糖,這些單糖以重復單位互相聚合在一起。

大部分雜多糖的用處在于它們能夠改變水溶液中的粘度和液流學性質。此外,雜多糖還有相關的次要功能,如乳化作用,懸浮,穩定,及絮凝作用等等。參見示例,美國專利4,326,052,4,401,760。

雜多糖被廣泛用于食品,鉆井,農業及各種各樣其它工業應用上。近幾十年來,商業上對這些水溶性膠的需求大大增加。另外,新的工業技求產生對新的物理性質的雜多糖的需要。所以,對不同功能性范圍的雜多糖的需要,結合商業上的需求,都已明顯地說明發展新的、有不同物理特性的新型雜多糖是十分需要的。

因而,本發明的一個目的就是提供一種新型雜多糖,該雜多糖是由一種微生物野油菜黃單胞菌的新菌株所產生的。本發明的另一個目的是提供制備這種新型雜多糖的方法。還有一個目的是提供生產這種新化合物的微生物。另外,本發明還提供配制含有這種新型雜多糖的配方。本項發明的所有這些目的將在下面詳盡說明。

現已發現,野油菜黃單胞菌一種新菌株通過在某一選擇性碳源上作用可產生一種新型雜多糖。該雜多糖主要由碳水化合物,和大約12%蛋白以及7%酰基(以0-乙酰基計算)所組成。碳水化合物部分含有重量比為19%的葡萄糖醛酸及中性糖-鼠李糖和葡萄糖,這兩種糖的摩爾分子數比例約為2∶1。這個新型化合物是通過野油菜黃單胞菌的新菌株在合適液體營養培養基中有氧發酵而制備的。根據布達佩斯條約,這種微生物菌株的生物純培養于1985年6月19日,按注冊號ATCC????53159保存在美國馬里蘭州,洛克菲勒的美國菌種保藏中心。這種雜多糖,這里命名為雜多糖S-657,在水溶液系統中具有我們期望的那些特性,尤其適用于配制油井處理液體。

本發明的這種新型微生物是從一種采自美國加州尤里卡地區附近沼澤地的藻類樣品中分離得到的。經過30℃溫度下培養4天,從YM瓊脂平板上挑選出這種呈膠狀菌落的微生物,然后這種分離物在營養瓊脂培養基上進一步純化培養。

取在營養瓊脂培養基上的分離株接種到種子三角瓶中培養。然后再取三角瓶中培養物用作種子接種到另一個含有以水解淀粉作為碳源的營養培養基的三角瓶中培養,培養后發現三角瓶中含有一種粘液,加入異丙醇后,可見一種纖維狀物質沉淀下來。另一個三角瓶種子培養,用來測定各種營養培養基對膠產量的影響,以及測定這種微生物生長用最佳培養基和發酵條件。

雜多糖S-657是在控制的條件下,接種ATCC????53159菌株培養物,通過在營養培養液中有氧發酵而產生的。所用培養基含有可同化的碳源,氮源和無機鹽。

一般來說,碳水化合物(例如葡萄糖,果糖,麥芽糖,蔗糖,木糖,乳糖等)在營養培養基中能被單獨或聯合在一起用作可同化的碳源。培養基中所用的一種或多種碳源的確切數量部分程度上取決于培養基中所含的其它成分。但是總的來說,所用碳水化合物量通常在培養基重量的2%~5%之間。這些碳源在培養基中能被單獨或聯合使用。

總的來說,許多蛋白質性物質可被用作發醇過程的氮源。合適的氮源包括如酵母水解物,粗酵母,大豆粉,棉籽粉,酪蛋白水解物,玉米漿,蒸餾酒廠廢液濃縮物,蕃茄醬等等,這些氮源既可單獨也可聯合使用;用量范圍通常為液體培養基重量的0.05%~0.2%。

那些可摻入培養基中的營養無機鹽常為一些鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、鈣鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、鹽酸鹽、碳酸鹽及其類似的離子。也包括一些微量的金屬元素如鈷、錳、鐵、鎂。

提請注意的是,我們這里所列舉的培養基僅僅是說明可被使用的培養基種類很多,而不是想就限制在這些。

用一種更替的培養基,S-657菌株可在低鈣條件下生長,也即在去離子水或一些實際上不含鈣離子的其它水溶液系統中。(也即最終發酵培養基中每1%膠液中含有鈣離子濃度小于4ppm)。

發酵在溫度25°~35℃范圍內進行,然而為獲得最佳結果,常在溫度28°~32℃下進行發酵,用以培養ATCC53159菌株和生產雜多糖S-657,培養基的PH值可在6-8范圍內變動。

盡管雜多糖S-657用表面培養和浸沒培養都能產生,但通常都選用在浸沒狀態下進行發酵。

小規模的發酵可以很方便地將培養物接種入合適的營養培養基中進行,轉到生產培養基中后,就讓發酵在大約30℃恒定溫度下,在搖床上進行數天。

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