[其他]用重組DNA技術(shù)制備乙型肝炎顆粒的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 86102640
• 申請日: 1986-04-15
• 公開（公告）號(hào): CN86102640A
• 公開（公告）日: 1987-04-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 約翰·S·薩爾斯特羅姆;馬克·L·羅爾伯;翰斯·索馬
• 申請（專利權(quán)）人: 恩多特羅尼克斯公司
• 主分類號(hào): C12N15/00
• 分類號(hào): C12N15/00;C12P21/02;A61K39/29;G01N39/54
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利代理部
• 代理人: 顧柏棣,辛敏忠

1、一種重組DNA載體，該載體包括：

一種編碼Pre S₁-Pre S₂-S編碼區(qū)的DNA序列；和金屬硫因基因的啟動(dòng)子。

2、權(quán)利要求1的載體，其中所述的金屬硫因基因啟動(dòng)子是摻入到包括DNA序列的載體中取代或不取代天然啟動(dòng)子，優(yōu)選的是在緊靠Pre S₁-Pre S₂-S蛋白編碼區(qū)的上游處摻入。

3、權(quán)利要求1的載體，該載體進(jìn)一步包括選擇識(shí)別物，優(yōu)選抗藥識(shí)別物，如新霉素抗性基因，和/或轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)，如SV40終止位點(diǎn)或小鼠珠蛋白基因的DEF區(qū)。

4、權(quán)利要求1的載體，該載體不含任何病毒基因碎片和/或不是致癌性的。

5、一種重組DNA多聯(lián)體，該多聯(lián)體包括權(quán)利要求1的載體作為第一載體和至少一種附加載體，該附加的載體包括下述編碼區(qū)中的一種：Pre S₁- Pre S₂- S蛋白編碼區(qū)，Pre S₂- S蛋白編碼區(qū)或S蛋白編碼區(qū)，和金屬硫因基因的啟動(dòng)子。

6、權(quán)利要求5的多聯(lián)體，其中的金屬硫因基因啟動(dòng)子摻入到附加的載體之中，并且優(yōu)選在緊靠Pre S₁- Pre S₂- S蛋白編碼區(qū)的上游處摻入。

7、權(quán)利要求5的多聯(lián)體，其中第一和/或附加載體包括轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)，如小鼠珠蛋白基因的DEF區(qū)，以及/或選擇識(shí)別物。

8、權(quán)利要求5的多聯(lián)體，其中的DNA載體不含病毒碎片。

9、一種被轉(zhuǎn)染的真核細(xì)胞，該細(xì)胞是被權(quán)利要求1至4中任一權(quán)利要求的重組DNA載體或權(quán)利要求5至8中任一權(quán)利要求的多聯(lián)體轉(zhuǎn)染的。

10、一種被聯(lián)合轉(zhuǎn)染的真核細(xì)胞，使用的被稱作第一重組DNA載體的是權(quán)利要求1至4的重組DNA載體，和第二重組DNA載體，第二重組DNA載體包括Pre S₂-S蛋白編碼區(qū)或S蛋白編碼區(qū)和金屬硫因基因的啟動(dòng)子。

11、一種被聯(lián)合轉(zhuǎn)染的真核細(xì)胞，其中使用權(quán)利要求1至4的重組DNA載體，被稱為第一重組DNA載體，第二重組DNA載體包括Pre S₂-S蛋白編碼區(qū)，第三重組DNA載體包括金屬硫因基因的啟動(dòng)子和選擇識(shí)別物，第三載體中的金屬硫因基因啟動(dòng)子優(yōu)選定位于緊靠選擇識(shí)別物的上游處。

12、權(quán)利要求10或11的細(xì)胞，其中的金屬硫因基因啟動(dòng)子摻入到第二載體中并且優(yōu)選定位于緊靠Pre S₂-S蛋白編碼區(qū)的上游處。

13、權(quán)利要求10或11的細(xì)胞，其中的第二和/或第三載體包括轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)如小鼠珠蛋白基因的DEF區(qū)，和/或其中的第二載體包括選擇識(shí)別物。

14、權(quán)利要求10或11的細(xì)胞，其中的第二和/或第三DNA載體不含病毒DNA碎片。

15、權(quán)利要求10或11的細(xì)胞，其中的DNA載體包括不同的選擇識(shí)別物。

16、權(quán)利要求11的細(xì)胞，其中的第一，第二和/或第三載體包括復(fù)制子。

17、權(quán)利要求9至16中任何一項(xiàng)所述的細(xì)胞，其中的真核細(xì)胞是哺乳動(dòng)物細(xì)胞，如中華倉鼠卵巢細(xì)胞，vero細(xì)胞，L-細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞和大鼠成纖維細(xì)胞。

18、一種制備權(quán)利要求9的真核細(xì)胞的方法，該方法包括：

用權(quán)利要求1至4中任何一項(xiàng)所述的重組DNA載體或權(quán)利要求5至8中任何一項(xiàng)所述的多聯(lián)體轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。

19、制備權(quán)利要求10的真核細(xì)胞的方法，該方法包括：

用權(quán)利要求1至4中任何一項(xiàng)所述的重組DNA載體或權(quán)利要求10和12至15中任何一項(xiàng)所述的第二重組DNA載體聯(lián)合轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。

20、制備權(quán)利要求11的真核細(xì)胞的方法，該方法包括：

用權(quán)利要求1至4中任何一項(xiàng)所述的重組DNA載體和權(quán)利要求11至16中任何一項(xiàng)所限定的第二和第三重組DNA載體聯(lián)合轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。