[其他]系列載體式細菌培養基及其制備

無效

• 申請號: 86100926
• 申請日: 1986-02-06
• 公開（公告）號: CN86100926A
• 公開（公告）日: 1987-08-26
• 發明（設計）人: 宛吉斌
• 申請（專利權）人: 宛吉斌
• 主分類號: C12M1/20
• 分類號: C12M1/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及細菌培養基及其制備方法。以往，細菌培養基都是以瓊脂為基質，再加入某些細菌生長所需的營養劑、細菌生長產物的指示劑和對所需細菌以外的細菌抑菌劑等混合制成的。由于這種經典方法可以通過營養劑和細菌抑菌劑的選擇和劑量調節，制備出適合于培養各種細菌的培養基，具有較好的選擇性和廣泛的實用性。所以，這種經典培養基及其制備方法沿用了五十余年，迄今未有改變。

但是，不容置疑，這種經典方法還是有其不足之處的，今列舉如下：

一、由于細菌培養基是培養細菌時臨時配制的，每次制備培養基都必須進行稱量試劑，加水溶解，調節PH，高壓滅菌，分裝平皿，冷卻凝固等一系列復雜的操作，相當費時、費工。

二、由于在制備培養基時，不論做很少幾個或者很多個培養試驗，都需要經歷操作的全過程，所以在使用少量的培養基時，試劑和人力的浪費是相當可觀的。

三、雖然剩余的或者預先制備的培養基液可以保存在冰箱中，但是保存時間不能太長，因為一旦長菌就不能再用;另外，保存太占空間，影響冰箱的利用率，難以克服浪費。

四、因培養基只能澆注在平皿中或者貯存在三角燒瓶等玻璃容器中，不便于挪動，又容易破損。

五、在用三角燒瓶內的培養基時，必須用水浴加熱1～2小時，使培養基融化，再注入平皿，待其凝固后再使用，比較費時。

本發明的目的在于：提供一種制備方便、價格較低、容易保存、使用方便、效果優良的系列紙片式培養基及其制備方法。這種系列紙片式培養基與相應的瓊脂培養基（例如：肉湯瓊脂、肉湯馬血清瓊脂、SS瓊脂、伊紅美蘭瓊脂、高鹽瓊脂等）具有完全相同的效果。

紙片式細菌培養基的制備：

用細菌生長營養劑、細菌產物指示劑和所需（培養）菌以外的細菌抑菌劑制成細菌培養液（適合于各種不同細菌培養的培養液，可以通過對上述營養劑、抑菌劑等的選擇和劑量控制制備），經高壓滅菌制成無菌培養液;取特制的中性濾紙（約500g/m²）切成所需形狀和大小的紙片（一般為φ50～90mm的圓片），經高壓滅菌（15磅、20分鐘），將此紙片浸入用上述試劑制成的無菌培養液，使紙片吸足培養液，取出攤開，在低于80℃的溫度下干燥，制成含培養液的“紙片”;在無菌室內，用不影響細菌生長的化學漿糊或其它粘合劑涂在干燥“紙片”邊緣，使粘合劑成為寬度為1～2mm的環形薄層，再把與上述“紙片”同樣大小的孔徑小于0.45μ的微孔濾膜（該膜可用硝化纖維素酯、醋酸纖維素酯或混合纖維素酯，也可用質 地致密的有彈性的纖維素材料，如：紙等制作）與上述“紙片”重合并粘好（注意：在粘合前務必把對合的兩面用紫外線滅菌）干燥后，裝入塑料袋并封口，再用紫外線輻照兩面，滅菌后即成產品“紙片式細菌培養基”。此產品耐干、耐濕、耐熱、耐寒，可保存較長時間。還需指出：（1）所有目前使用的瓊脂培養基都可以用上述方法制成“紙片式培養基”;（2）本培養基可以不用瓊脂，其它成份與經典的瓊脂培養基基本上相同;（3）上述紙片也可用其它多孔材料代替。

為了改善檢菌試驗的觀察效果，在制備培養基時，可在培養液內加入細菌染色劑，或者通過劑量控制來達到目的;為方便地使用某些特種培養基，在制備時須采取特種方法。例如：

在制備普通肉湯或肉湯血清紙片式培養基時，可在培養液內加入 1/100 培養液體積的0.1%TTC（2、3、5-氯化三苯基四氮唑）細菌染色劑，使生長的細菌菌落呈紅色，在白色紙片的陪襯下更顯鮮明，易于早期識別。

制備伊紅美蘭紙片式培養基時，試劑伊紅和美蘭溶液可按常規劑量加倍。這樣，使生長的大腸菌群呈紫紅色，易于觀察和早期識別。

在制備與血瓊脂相當的血紙片式培養基時，可把肉湯與脫纖維羊（或兔）血以100∶5～10的比例混合，然后從微孔濾膜面加入，直至飽和（最好再過量一些），使膜面形成血的薄膜，便于使用，所加 培養液的量務必適度。

本培養基的使用方法：

剪開塑料袋，用無菌鑷子夾取紙片，放入無菌平皿（注意：濾膜面向上），從紙片邊緣加入無菌蒸餾水，使紙片濕透至飽和，傾出平皿中的余水，用實驗材料（例如：傳代細菌，培養痰、糞便、膿、尿或者其它分泌物等）作劃線接種，蓋好平皿，翻扣于溫箱內培養，次日觀察菌落。（如果平皿質量差而不能密閉，倒扣后，在上蓋中加入1～2mL無菌蒸餾水，以維持皿內濕度）。

接種時，因所加之水很難將吸附在紙片上的試劑完全溶析，會影響培養基成份，為了改善培養條件，制備紙片式培養基的各種試劑劑量最好要適當增加（必要時，可加倍）。