[其他]胞苷和/或脫氧胞苷的生產方法

無效

• 申請號: 85108240
• 申請日: 1985-11-16
• 公開（公告）號: CN85108240A
• 公開（公告）日: 1986-07-02
• 發明（設計）人: 朝日知;常見裕;土井宗晴
• 申請（專利權）人: 武田藥品工業株式會社
• 主分類號: C12P19/38
• 分類號: C12P19/38;//
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 陶令靄

本發明是有關胞苷和/或脫氧胞苷生產的方法及微生物。

胞苷和脫氧胞苷可用作合成藥物的原料。本發明是關于a）利用發酵生產胞苷和/或脫氧胞苷的方法，和b）使用在上述方法中的芽孢桿菌（Bacillus）屬的微生物。

利用發酵作用生產胞苷的已知方法包括a）使用枯草芽孢桿菌（Bacillus????Subtilis）或雷極氏變形桿菌（Proteus????rettgeri）變種的方法（日本特許公開No????21499，1961年）b）使用由短桿菌（Brevibacterium）屬細菌誘導而得的一種抗嘌吟類似物系，抗嘧啶類似物系和/或抗組氨酸類似物系的方法（日本特許公開No????18871，1982年），和c）使用由小桿菌（Microbacterium）屬細菌誘導而得的抗嘌吟類似物系的方法（日本特許公開No????18872，1982年）。

然而，在培養介質中產生和積累大量脫氧胞苷的方法不得而知。

本發明提供了一個在有關產量等方面，更有效生產胞苷和脫氧胞苷的工業方法。

發明人經過對產生胞苷和脫氧胞苷的細菌進行大量的研究工作后，發現對嘧啶類似物有抵抗力的，缺乏胞苷脫氨酶活力的芽孢桿菌屬的微生物在培養介質中產生和積累了大量的胞苷和/或脫氧胞苷，在這一發現的基礎上，繼續研究完成了本發明。

本發明包括（1）胞苷和/或脫氧胞苷生產的方法，其特征在于把對嘧啶類似物有抵抗力的，有產生胞苷和/或脫氧胞苷能力的，缺乏胞苷脫氨酶活力的芽孢桿菌屬的微生物培養在培養介質中，以收集在培養介質中所產生和積累的胞苷和/或脫氧胞苷，和（2）對嘧啶類似物有抵抗力的，缺乏胞苷脫氨酶活力的枯草芽孢桿菌。

在本發明中，對“缺乏胞苷脫氨酶活力系”，“抗嘧啶類似物系”，“嘧啶類似物”分別作如下的定義：

缺乏胞苷脫氨酶活力系

當采用通過超聲作用破裂的細胞所獲得的離心上層清液部分，按D.F.Wentworth等人的方法（“酶學方法”第LI卷，P.A.霍菲和M.E.瓊斯編寫，科學出版社，紐約，1978，P.401）測定時，其胞苷脫氨酶活力度小于0.01單位/毫克-蛋白質的微生物。（酶活力是1毫微摩爾（nM）胞苷在一分鐘內被脫氨就定義為一個單位）

抗嘧啶類似物系

由芽孢桿菌屬細菌誘導而得的微生物，它們的遺傳特性已改變為使它們在對其親代系生長來說含嘧啶類似物濃度過高的培養介質中也能生長。

嘧啶類似物

一種有與嘧啶骨架類似結構的物質，例如：尿嘧啶和胞嘧啶;如：6-氮尿嘧啶，2-硫尿嘧啶，5-氟尿嘧啶，5-氟乳清酸和它們的核苷和核苷酸。至少對這些物質中一個有抵抗力的微生物被稱為“抗嘧啶類似物系”。

在本發明中所使用的微生物是枯草芽孢桿菌AU-50（IFO????14395，FERM????BP-907），枯草芽孢桿菌FU-11（IFO????14383，FERM????BP-908），枯草芽孢桿菌6AU-500（IFO????14407，FERM????BP-909）和枯草芽孢桿菌2TU-200（IFO????14408，FERM????BP-910）。

在它們中間，枯草芽孢桿菌AU-50和FU-11系是由枯草芽孢桿菌（IFO????13719，ATCC????6051）誘導而得的，6AU-500和2TU-200系是由枯草芽孢桿菌No????122（IFO????14386，FERM????BP-859）誘導而得的。

枯草芽孢桿菌AU-50，FU-11，No????122菌株和枯草芽孢桿菌6AU-500，2TU-200菌株已分別于1984年10月19日和1984年12月3日寄存在日本通產省工業科學技術院發酵研究所（FRI），寄存號為Ferm????P-7911，P-7912，P-7908，P-7971和P-7972，上述寄存物現已變成布達佩斯條約下的寄存物，貯存在FRI，寄存號為Ferm????BP-907，BP-908，BP-909和BP-910。

上述的親代系中，枯草芽孢桿菌（IFO????13719，ATCC????6051）是一個已知的系，它在1978年由大坂發酵研究所發行的第六版的“培養物表”中以及1982年由美國典型培養物保藏中心（ATCC）所發行的第十五版的“菌株I的目錄”中已有記敘，而枯草芽孢桿菌No????122（IFO????14386，FERM????BP-859）是一個由發明人新從土壤中分離而得的系。No????122系的菌學特性如下所述：