[其他]掌狀葉大黃的莖尖培養(yǎng)法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 85106601
• 申請日: 1985-08-31
• 公開（公告）號: CN85106601A
• 公開（公告）日: 1986-09-03
• 發(fā)明（設計）人: 金子光
• 申請（專利權(quán)）人: 和喜伊藤公司
• 主分類號: A01G7/00
• 分類號: A01G7/00;C12N5/00
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 劉元金,羅宏

本發(fā)明是有關掌狀葉大黃（以下說明的掌狀葉大黃是日本藥典第十次修正此記載的Rheum????palmatum????linne′，Rheum????offic-inale????Baillon，Rheum????tanguticum????Maximowicz????Rheum????coreanum????Nakai，以及介于這些種之間的雜種，但不包括Rheum????undulatum????L.Rheum????rhaponticum????L）的莖尖養(yǎng)法、更確切地說是關于可行的掌狀葉大黃的培養(yǎng)增殖的方法。

蓼科大黃屬（Rheum）是生長于歐亞大陸各地植物群，根據(jù)葉身形狀不同而分為圓葉大黃和掌狀葉大黃，自花不親合而多要通過種間雜交，種子的特性是具有僅通過營養(yǎng)繁殖來保持共同的性質(zhì)。而圓葉大黃是用于果醬等食品，掌狀葉大黃則廣泛地用作以瀉甙（senn-oside）A，B，C，D，蒽醌類、丹寧類等為藥效成份的生藥。

可是，大黃存在屬有1個問題，就是如上所述由于多是種間雜交等原因，所以就不可能大量地以及常年穩(wěn)定地獲得具有一定質(zhì)量的大黃。因而很早以來采用營養(yǎng)增殖法的方法以及作為這種植物的組織培養(yǎng)法而為公所周知的莖尖培養(yǎng)法等就一直在進行研究。例如沃爾基氏等（D，G、A、Walkey????＆????K、A、MatheWs）就提出過有關圓葉大黃中的R、rhaponticum????Timpertey????Early的莖尖培養(yǎng)法（Plant????Science????Letters，14，287…290（1979）。沃爾基氏等的方法之特征是;在加有激動素及β吲哚基乙酸的培養(yǎng)基上進行莖尖培養(yǎng)。

然而本發(fā)馀人通過對掌狀葉大黃施于同樣的方法試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)生長點細胞沒有增殖而枯死。一般認為這是由于圓葉大黃和掌狀葉大黃種類的不同而對生長激素的要求不同所致。

本發(fā)明從上述的觀點出發(fā)而旨在于提供可行的具有藥效成份的掌狀葉大黃的培養(yǎng)增殖的方法。

另外，本發(fā)明的另一目的就是通過在一定條件下的培養(yǎng)能夠通過均一而且理想的育苗，保種而獲得穩(wěn)定的含有一定質(zhì)量的有效成份的大黃。

達成上述之目的的本發(fā)明之莖尖培養(yǎng)法所具有的特征是采用含有有芐腺嘌呤或者是其的核苷（芐腺苷）和萘乙酸或者是β吲哚基乙酸的培養(yǎng)基，來進行新芽的形成和增殖，然后在只含有萘乙酸或者β吲哚基乙酸中任何一種來作為生長激素的培養(yǎng)基上來讓其生根。

有關本發(fā)明所具有的特征是基于經(jīng)過反復多種的試驗之結(jié)果而形成的，以下對此給予詳細地說明。

當有在以下的說明里，對于廣義的生長激素這個詞，主要是作用于形態(tài)生長的就稱態(tài)生長激素，而主要是作用于分化促進的就稱分化促進激素，這樣來便于使用。這些詞雖然可能說能夠符合多數(shù)研究者的意見，但是本發(fā)明人認為在說明本發(fā)明時是有效而且是比較合理的用語。

所謂的本發(fā)明之莖尖培養(yǎng)法是指適用于無菌取出生長點，培養(yǎng)（新芽形成、增殖、生根）、及幼苗栽培。

無菌取出生長點

大黃的生長點存在于根莖最上部，一般是生長期（4月下旬至10月上旬）用刀具把根莖部切斷，除去露出部、滅菌、水洗后在解剖顯微鏡下用刀具取出。

培養(yǎng)

培養(yǎng)工程是按新芽（葉片，葉柄，幼芽愈合體素）形成，增殖（分化）以及生根的順序三個工程來進行。這些各個工程都是根據(jù)適宜的培養(yǎng)方法以及適宜各個工程的培養(yǎng)基的選擇來決定適當?shù)呐囵B(yǎng)條件。

培養(yǎng)基是由一般的基礎培養(yǎng)基也就是在無機鹽組成里含有碳（C）源，維他命類等有機物主要成份的含成培養(yǎng)基加上特定的形態(tài)生長激素及分化促進而形成的。

本發(fā)明的特征是在上述新牙形成、增殖（分化）的前二個工程里、是使用萘乙酸或者β吲哚基乙酸的任何一種來作為形態(tài)生長激素，而作為分化促進激素則使用芐基腺嘌呤，芐基腺嘌呤是可以以核苷即芐腺甙代替使用。

上述萘乙酸的濃度一般可在1.1×10^-5-4.2×10^-5mol/l范圍內(nèi)使用，較好的范圍是2.1×10^-5-4.2×10^-5mol/l，最適宜的使用約為2.1×10^-5mol/l。而在1.1×10^-5mol/l以下分蘗度就不允分，在4.2×10^-5mol/l以上，特別在5.3×10^-5mol/l就有出現(xiàn)藥害的傾向。