[其他]奶牛控性生母方法

無效

• 申請號: 85104679
• 申請日: 1985-06-13
• 公開（公告）號: CN85104679A
• 公開（公告）日: 1987-02-04
• 發明（設計）人: 王公佐;劉邦和
• 申請（專利權）人: 王公佐;劉邦和
• 主分類號: A61D7/02
• 分類號: A61D7/02
• 代理公司: 遼寧省遼陽市專利事務所
• 代理人: 付景武

本發明屬于奶牛繁殖技術的一種方法。

在奶牛繁殖技術中，均推行冷凍精液和人工授精方法，精液冷凍時只按一定比例加入冷凍保護液平衡后即滴凍顆粒，人工授精時使用的解凍液其pH為7.0左右，這對精液中含X染色體和含y染色體兩種類型精子，均有很好保護作用，所以其后代性別比例接近1∶1，實際上往往是生公牛略多于生母牛，這在經濟上是不合算的，而奶牛生產者希望多生母牛，因為母牛通常比公牛值錢。為增加多生母牛的機會，獲取更大的經濟效益，人們渴望有一種有效的方法，在奶牛繁殖時能控制胚胎性別，使其多生母牛。目前，雖然研究探索一些性別選擇方法，但多停留在實驗研究階段，真正在奶牛生產中應用，還沒有可行的方法。

本發明的目的是要提供一種在奶牛繁殖時控制胚胎性別使其多生母牛的方法。

發明是這樣實現的：

給奶牛進行人工授精時，先準確進行發情鑒定，判定排卵時間，輸精時機掌握在排卵前4小時至排卵后2小時。輸精前用輸精管探取子宮頸口粘液測其pH，并根據pH大小，確定向子宮內注入酸性緩沖液數量，一般注入40～50毫升，造成利于含X染色體精子存活和受精的環境。向子宮內注入酸性緩沖液后，隨時檢測子宮頸口pH變化，一般經10～15分鐘，當子宮頸口pH達到5.8～6.0時，為最佳輸精時間，此時立即輸入事先用生母液解凍的常規冷凍精液;或者輸入通過精液分離后冷凍的含X染色體精子較多的冷凍精液。解凍后精子活力達到0.25～0.3以上時即可用于輸精。在一個情期內只輸精一次。采用這種調整奶牛生殖道酸堿度并用生母液解凍精液的方法，當X、y兩種類型的精子同處于pH6.0的條件下，含y染色體精子的活性受到抑制，含X染色體精子在弱酸性環境中有較好的活力和受精能力，所以雌性后代比例提高，如使用通過精液分離后冷凍的含X染色體精子較多的冷凍精液，就更充分發揮了含X染色體精子的優勢，結果使80%～85%的懷孕牛生母牛。

奶牛常規人工授精一個情期一般輸精2次，采用控性生母方法因準確判定排卵時機，一個情期只輸精一次，二者受胎率無顯著差異，其后代生長發育正常，操作術式，所用器材及成本相差不多，但控性生母方法比常規人工授精生母率提高30%～35%。

含X染色體精子較多的冷凍顆粒是這樣制取的：在18～20℃暗室內，將采取的奶牛精液鏡檢合格后，立即用分離稀釋液稀釋至25毫升，稀釋液溫度保持在32～37℃，要比原精液溫度低1℃用無菌的100毫升玻璃注射器抽取稀釋的25毫升精液，排出氣體，堵塞注射器嘴，將注射器水平放置在分離木架正面的托板上，在分離架正面42.5厘米處安裝一個300W燈泡為光源，其光源高度為10厘米，將燈泡前端對準注射器裝精液部分進行照射，光照40分鐘分離結束。試驗證明，當操作者和光源同一方向面對注射器并且注射器嘴指向操作者左側時，則分離后注射器內前 1/2 精液大部分含X染色體精子，后 1/2 精液大部分含y染色體精子。平穩緩慢推出前 1/2 精液，約12毫升，裝于集精瓶內。因分離時加入分離稀釋液，降低了精液密度，為保證每一輸精劑量的有效精子數，需將分離后含X染色體精子較多的精液離心濃縮，每分鐘1200轉離心5分鐘，取出靜置5分鐘，吸出部分上清棄掉，使每毫升沉淀內精液密度保證在3.5億以上，再按分離稀釋液實際量，以分離稀釋液75、卵黃20、甘油5的比例加入卵黃和甘油，按20℃16℃、12℃逐級降溫，每次降溫15分鐘，然后按常規冷凍精液操作規程制做冷凍精液。

所用配方如下：

酸性緩沖液：pH3.0

5%葡萄糖????500毫升

乙????酸（36%）14.5毫升

現用現配。

生母液：??pH6.0

雙重蒸餾水????1000毫升

蔗????糖????11.5克

檸檬酸鈉????14.0克

磷酸二氫鉀????3.3克

氨苯磺胺????3.0克

檸檬酸????1.0克

以檸檬酸增減調pH為6.0。每安瓶分裝4毫升，滅菌備用。

分離稀釋液：

分析純蔗糖????12克

雙重蒸餾水????100毫升

每100毫升12%蔗糖溶液加青、鏈霉素各10萬單位。

下面是本發明的實施例：

首先對奶牛進行發情鑒定，判定排卵時間，在排卵前4小時至排卵后2小時內輸精效果最好。準備輸精前，用輸精管探取子宮頸口粘液，測其pH大小，當子宮頸口pH在7.2以下時，向子宮注入酸性緩沖液40毫升，注入后10～11分鐘即可輸精;子宮頸口pH在7.2～7.4時，向子宮注入酸性緩沖液50毫升，注入后15分鐘即可輸精;子宮頸口pH在7.5以上時，向子宮注入酸性緩沖液50毫升，注入后13分鐘即可輸精。原則上要掌握向子宮注入酸性緩沖液后需檢測子宮頸口pH大小，當其pH達5.8～6.0時為最佳輸精時間，上述注入酸性緩沖液后經10～15分鐘輸精，是根據試驗證明此時子宮頸口pH剛好達到5.8～6.0，這是一般規律。初做者，試驗5頭牛即可確定注入酸性緩沖液后子宮頸口達到5.8～6.0所需的時間。注入酸性緩沖液后，在予定輸精前4～5分鐘用2毫升生母液將2粒常規冷凍精液解凍，或者用2毫升生母液將2粒通過精液分離后冷凍的含X染色體精子較多的冷凍精液解凍，解凍后精子活力達到0.25～0.30以上時即可用于輸精。在輸精前1分鐘將裝精液的輸精管送達輸精部位，等到輸精時間立即輸精。在一個情期內只輸精一次。在向子宮注入酸性緩沖液時，可用細膠管接鐘頭柄連接注射器和輸精管，即可緩慢順利注入。按上法操作，可使懷孕奶牛生母率達到80%～85%。